【摘 要】
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目的 应用基因重组方法 构建携带人硫氧还蛋白(hTRX)基因的复制缺陷型重组腺病毒.方法 用内切酶、RT-PCR、测序方法获得目的基因片段,然后将其cDNA克隆至表达载体pShuttle构
【机 构】
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哈尔滨医科大学生理学教研室,哈尔滨医科大学地方病控制中心克山病研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金;黑龙江省自然科学基金;黑龙江省教育厅科研基金
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目的 应用基因重组方法 构建携带人硫氧还蛋白(hTRX)基因的复制缺陷型重组腺病毒.方法 用内切酶、RT-PCR、测序方法获得目的基因片段,然后将其cDNA克隆至表达载体pShuttle构建hTRX的重组真核细胞表达载体pShuttle-hTRX,在HeLa细胞中进行瞬时表达检测.从真核表达载体pShuttle-hTRX 切下目的基因,并插入至腺病毒载体构建hTRX的重组腺病毒载体Adeno-hTRX,经PCR方法亦证明了成功构建腺病毒重组体.重组腺病毒在293细胞中扩增、纯化.结果 成功构建了携带人硫氧还蛋白基因的复制缺陷型重组腺病毒,并以多种方法 证实了构建载体的正确性.结论 正确构建的人硫氧还蛋白重组腺病毒载体,可为基因治疗心血管系统疾病打下良好基础.
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