【摘 要】
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背景:诱导多能干细胞定向分化后移植治疗解决了免疫排斥及伦理问题,其向心肌细胞的定向分化为心肌细胞再生研究提供了可能.目的:观察诱导多能干细胞分化的心肌细胞电生理功能.方法:体外培养诱导多能干细胞,采用直接悬浮培养法及分化培养基诱导形成拟胚体,观察细胞生长情况,记录心肌细胞的形成时间、数目和收缩率;使用Axon Axopatch 200B单探头超低噪声膜片钳放大器及MED64多电极阵列系统检测心肌细胞的电生理特点,以及观察分化心肌细胞对异丙肾上腺素的反应性;免疫荧光检测分化心肌细胞中心肌肌钙蛋白T的表达.结
【机 构】
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南充市中心医院心内科?川北医学院第二临床医学院,四川省南充市 637000;四川省医学科学院?四川省人民医院,四川省成都市610000;重庆医科大学附属第一医院,重庆市 400016;四川驰鼎盛通生物
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背景:诱导多能干细胞定向分化后移植治疗解决了免疫排斥及伦理问题,其向心肌细胞的定向分化为心肌细胞再生研究提供了可能.目的:观察诱导多能干细胞分化的心肌细胞电生理功能.方法:体外培养诱导多能干细胞,采用直接悬浮培养法及分化培养基诱导形成拟胚体,观察细胞生长情况,记录心肌细胞的形成时间、数目和收缩率;使用Axon Axopatch 200B单探头超低噪声膜片钳放大器及MED64多电极阵列系统检测心肌细胞的电生理特点,以及观察分化心肌细胞对异丙肾上腺素的反应性;免疫荧光检测分化心肌细胞中心肌肌钙蛋白T的表达.结果 与结论:①诱导多能干细胞生长特点与胚胎干细胞相似,形似鸟巢,呈集落样生长;②在分化培养基培养下,悬浮培养5 d后诱导多能干细胞聚集而形成大小不一的拟胚体,在拟胚体贴壁生长期间,最高将近10％的菌落出现跳动的心肌细胞,第20天和第25天时的搏动率明显高于其他时间点,差异有显著性意义(P<0.05);③诱导多能干细胞分化的心肌细胞观察到了心室、心房和窦房结样细胞的动作电位;④异丙肾上腺素可以提高诱导多能干细胞分化的心肌细胞自发搏动频率;⑤细胞免疫荧光提示诱导多能干细胞分化的心肌细胞中肌钙蛋白T呈阳性表达;⑥结果表明,诱导多能干细胞分化的心肌细胞具有窦房结样、心房样和心室样的动作电位,且具有肾上腺素信号传导.
其他文献
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背景:研究发现,干细胞衍生的外泌体可通过多种途径促进脊髓损伤后运动功能的恢复.目的:研究骨髓间充质干细胞来源外泌体是否通过减轻血脊髓屏障的破坏来促进脊髓损伤后运动功能的恢复.方法:60只SD大鼠随机分成假手术组、模型组和外泌体组(n=20),采用改良Allen\'s法建立大鼠脊髓损伤模型,外泌体组在损伤后30 min,1 d分别经尾静脉注射200μL骨髓间充质干细胞来源外泌体,在损伤后第3天,通过伊文思蓝染色观察血脊髓屏障通透性,Western blot检测基质金属蛋白酶9及紧密连接蛋白claudin
背景:长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)-DANCR可调节包括骨代谢的多个生物学过程.课题组基因芯片结果显示糖尿病骨质疏松小鼠脂肪组织中LncRNA-DANCR显著高表达.目的:探究LncRNA-DANCR通过Wnt/β-catenin信号通路对糖尿病骨质疏松小鼠脂肪干细胞成骨能力的影响.方法:分离培养糖尿病骨质疏松小鼠和正常对照小鼠脂肪干细胞,成骨诱导3 d后,采用qRT-PCR、Western blot检测LncRNA-DANCR、Wnt信号分子β-catenin以
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背景:内皮功能障碍是动脉粥样硬化和心血管疾病的早期预测因子,脐带间充质干细胞移植为治疗血管损伤提供了可能性.目的:探讨过表达白细胞介素8受体A/B对人脐带间充质干细胞迁移能力的影响.方法:培养原代人脐带间充质干细胞和人脐静脉内皮细胞,转染含白细胞介素8受体A/B的腺病毒载体,荧光共聚焦和Western blot检测转染后细胞中白细胞介素8受体A/B的表达,然后通过CCK-8实验、竞争实验和黏附实验检测过表达白细胞介素8受体A/B对细胞增殖能力、竞争能力和迁移能力的影响.结果 与结论:过表达白细胞介素8受体
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