红曲霉HMW-DNA的制备

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【摘要】

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用低熔点琼脂糖包埋浓度为1×109～1×1010个/mL红曲霉原生质体液制备得到DNA胶块.经裂解和PMFS纯化后脉冲场电泳检测,胶块中的DNA片段长度在800kb以上,每个胶块DNA含

【作者】

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周礼红王正祥诸葛健

【机构】

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贵州大学生命科学学院,江南大学生物工程学院工业微生物研究中心

【出处】

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食品与发酵工业

【发表日期】

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2005年9期

【关键词】

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高分子量DNA BAC文库 DNA胶块脉冲场电泳红曲霉制备 DNA含量限制性内切酶电泳检测片段长度 high molecular weight DN

【基金项目】

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致谢：感谢国家人类基因组南方研究中心王生跃研究员和郑华军提供实验条件和给予的大力支持和帮助.感谢华南农大刘耀光教授在实验中给予的宝贵建议.

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用低熔点琼脂糖包埋浓度为1×109～1×1010个/mL红曲霉原生质体液制备得到DNA胶块.经裂解和PMFS纯化后脉冲场电泳检测,胶块中的DNA片段长度在800kb以上,每个胶块DNA含量为8～13 μg.DNA胶块经脉冲场电泳去除小于600kb的非目的小片段后用限制性内切酶EcoR Ⅰ、BamH I、Hind Ⅲ作用,结果大部分能被酶解.可以用于BAC文库等大片段基因组文库的构建,为红曲霉功能基因组的研究奠定了基础.

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