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马铃薯孢囊线虫是全球性的植物检疫性线虫，亦是我国重点关注的有害生物。针对马铃薯金线虫ITS序列，设计了引物和TaqMan探针，使用15个马铃薯孢囊线虫群体和4个其他孢囊线虫样品进行验证，可高度灵敏地检测单个马铃薯金线虫的孢囊或幼虫，并可进行定量；最高检测灵敏度达到10fg；同时开展了混合样品和未知样品的检测，证明了引物的专化性和TaqMan探针的特异性。该检测方法可自动化检测马铃薯金线虫并进行定量，适合进行标准化的常规检测。