【摘 要】
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目的对褐藻胶裂解酶基因aly-cob进行外源表达,并优化诱导条件以实现褐藻胶裂解酶的高效表达。方法以产褐藻胶裂解酶菌株Cobetia sp.WG-007为出发菌株,对克隆得到的褐藻胶裂解
【机 构】
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糖化学与生物技术教育部重点实验室,江南大学生物工程学院,粮食发酵工艺与技术国家工程实验室
【基金项目】
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江苏省产学研前瞻性联合研究项目(BY2016022-19);江苏省重大科技成果转化项目(BA2015006);四川省重点研发计划项目(2017JZ0043);国家海洋公益性行业科研专项经费项目(201305007)
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目的对褐藻胶裂解酶基因aly-cob进行外源表达,并优化诱导条件以实现褐藻胶裂解酶的高效表达。方法以产褐藻胶裂解酶菌株Cobetia sp.WG-007为出发菌株,对克隆得到的褐藻胶裂解酶基因进行稀有密码子改造,构建重组质粒pET-28a(+)-aly-cob,在宿主Escherichia coli BL21pLysS中进行诱导表达,对发酵培养基、异丙基-D-硫代半乳糖苷(IPTG)、诱导温度、诱导时机、诱导浓度及诱导时间进行系统优化以提高酶活。结果构建了重组菌E.coli BL21pLysS/pET-
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