【摘 要】
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基于木霉菌属真菌内转录间隔区(ITS)序列,设计特异性引物DG和DT应用于土壤木霉菌属基因组DNA的实时荧光定量检测,并建立相应的实时荧光定量PCR体系.应用该反应体系对黑土区长
【机 构】
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中国科学院东北地理与农业生态研究所中国科学院黑土区农业生态重点实验室,东京大学生物工学专攻,美国农业部农业研究局作物遗传研究中心
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基于木霉菌属真菌内转录间隔区(ITS)序列,设计特异性引物DG和DT应用于土壤木霉菌属基因组DNA的实时荧光定量检测,并建立相应的实时荧光定量PCR体系.应用该反应体系对黑土区长期无施肥(NF)、长期施用N、P化肥(NP)以及长期配施N、P化肥和有机肥(NPM)3种方式下大豆田土壤木霉菌基因组DNA进行绝对定量检测.结果表明,引物DG和DT对木霉菌属真菌有较好的特异性；实时荧光定量PCR反应标准曲线相关系数R2=0.993,斜率为-0.282 9,而熔点曲线无杂峰；在大豆生育时期的苗期,NF、NP及NPM
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