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目的高效包装含绿色荧光蛋白(GFP)的嵌合性抗原受体CD19重组慢病毒载体,对比不同启动子在T细胞中绿色荧光蛋白的表达效率。方法构建3种不同启动子及CD19-CAR的质粒p HAGE-CMV-EF1α-GFP-CD19、p HAGECMV-GFP-CD19、p HAGE-EF1α-GFP-CD19,转染293T细胞,镜下观察转染的细胞状态,72h后收集上清,PCR定量病毒载体RNA核酸拷贝数,通过流式细胞术以及Western blot法测定单、双启动子启动GFP及CD3ζ的表达情况;慢病毒液分别转染T淋巴细胞后,通过荧光显微镜检测慢病毒转染效果,Western blot法测定蛋白的表达水平。结果荧光显微镜观察:以293T细胞为靶细胞时,启动子由强到弱依次为CMV-EF1α>CMV>EF1α,流式结果显示,在293T细胞中的转导率分别为72.4%、20.6%、14.5%;Western blot法检测结果显示,在T细胞中启动子表达强弱为CMV-EF1α>EF1α>CMV。结论在以重组慢病毒为载体的基因研究过程中,为了提高病毒在感染细胞的转染率,需要正确选择启动子以及相应的靶细胞。