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以非洲黑麦、小麦-非洲黑麦双二倍体、安岳排灯麦等为材料筛选100条ISSR引物。其中,引物UBC815可在非洲黑麦中扩增出1条长561bp的特异性片段(命名为pSaUBC815 561),而小麦对照均未扩出该片段。引物UBC815同样能在黑麦属的瓦维洛夫黑麦(Secale vaviloviiGrossh.)、森林黑麦(Secale sylvestre Host.)等5个种扩增出pSaUBC815 561。根据pSaUBC815 56l设计特异PCR引物U815-F、U815-R,对小麦族多物种进行扩增,表