【摘 要】
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目的:探讨lncRNA CEBPA-AS1对胃癌细胞生物学行为的影响及其可能作用机制.方法:qRT-PCR法检测胃癌组织、癌旁组织与正常人胃上皮GES1细胞和人胃癌SNU-1、AGS、HS-746T细胞系中lncRNA CEBPA-AS1、miR-455-3p的表达量.si-NC、si-lncRNA CEBPA-AS1、miR-NC、miR-455-3p mimics、si-lncRNA CEBPA-AS1与anti-miR-NC、si-lncRNA CEBPA-AS1与an-ti-miR-455-3p分
【机 构】
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西安交通大学第二附属医院普通外科 陕西西安710004;西安交通大学第一附属医院普通外科 陕西西安710061
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目的:探讨lncRNA CEBPA-AS1对胃癌细胞生物学行为的影响及其可能作用机制.方法:qRT-PCR法检测胃癌组织、癌旁组织与正常人胃上皮GES1细胞和人胃癌SNU-1、AGS、HS-746T细胞系中lncRNA CEBPA-AS1、miR-455-3p的表达量.si-NC、si-lncRNA CEBPA-AS1、miR-NC、miR-455-3p mimics、si-lncRNA CEBPA-AS1与anti-miR-NC、si-lncRNA CEBPA-AS1与an-ti-miR-455-3p分别转染至SNU-1细胞(分别命名为si-NC组、si-lncRNA CEBPA-AS1组、miR-NC组、miR-455-3p组、si-lncRNA CEBPA-ASl +anti-miR-NC组和si-lncRNA CEBPA-ASl +anti-miR-455-3p组)后,MTT实验与平板克隆形成实验分别检测细胞增殖及克隆形成能力,Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力,双荧光素酶报告基因实验与qRT-PCR实验验证lncRNA CEB-PA-AS1与miR-455-3p的靶向调控关系,Western blot法检测MMP2、MMP9蛋白表达情况.结果:与癌旁组织比较,胃癌组织中lncRNA CEBPA-AS1的表达量显著升高,miR-455-3p的表达量显著降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05).与GES1细胞比较,SNU-1、AGS、HS-746T细胞中lncRNA CEBPA-ASl的表达量显著升高,miR-455-3p的表达量显著降低,其中SNU-1细胞的lncR-NA CEBPA-AS1表达量最高,差异均有统计学意义(均P＜0.05).与si-NC组比较,si-lncRNA CEBPA-AS1组细胞活力降低,细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少,MMP2、MMP9蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与miR-NC组比较,miR-455-3p组细胞活力降低,细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少,MMP2、MMP9蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).lncRNA CEBPA-AS1可靶向结合miR-455-3p,并可负调控miR-455-3p的表达.与si-lncRNA CEBPA-AS l+an-ti-miR-NC组比较,si-lncRNA CEBPA-AS l+anti-miR-455-3p组细胞活力升高,细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数增多,MMP2、MMP9蛋白表达水平升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:干扰lncRNA CEBPA-AS1表达可通过靶向调控miR-455-3p而抑制胃癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭.
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