【摘 要】
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目的探讨玻璃化冷冻对小鼠囊胚线粒体DNA(mt DNA)和线粒体相关基因mRNA表达的影响。方法本研究于2015年6月至2016年1月中山大学北校区实验动物中心完成。将180个小鼠囊胚分成
【机 构】
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中山大学附属第一医院生殖医学中心,
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目的探讨玻璃化冷冻对小鼠囊胚线粒体DNA(mt DNA)和线粒体相关基因mRNA表达的影响。方法本研究于2015年6月至2016年1月中山大学北校区实验动物中心完成。将180个小鼠囊胚分成玻璃化冷冻组(n=90)和新鲜组(n=90),每组30个胚胎用于mtDNA D环(D-loop)区测序分析;30个胚胎用于实时荧光定量PCR测mt DNA拷贝数;剩余胚胎用于实时荧光定量PCR检测线粒体转录因子A(Tfam)和DNA聚合酶γ(Polg1和Polg2)的m RNA表达,比较2组碱基突变率和mt DNA拷贝数及线粒体相关基因mRNA表达。结果对照组和玻璃化冷冻组均未发现碱基突变;对照组和玻璃化冷冻组的胚胎mt DNA平均拷贝数分别为2.9×105(s=1.4×10~5)和3.2×10~5(s=1.8×10~5),差异无统计学意义(P>0.05);两组胚胎的3个线粒体相关基因mRNA表达差异均有统计学意义(P<0.05),玻璃化冷冻组的3个基因m RNA表达均上调。结论玻璃化冷冻对小鼠囊胚mtDNA没有影响,但是会引起线粒体相关基因mRNA的表达上调。
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