研究内源性二氧化硫(SO₂)对氯化钴(CoCl₂)诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)氧化应激的调节作用。

采用200 μmol/L CoCl₂刺激大鼠原代PASMCs制备细胞模型，以慢病毒为载体进行基因转染，对内源性SO₂生成酶天冬氨酸氨基转移酶1(AAT1)进行过表达或敲低处理，分为空载体(vehicle)组、vehicle ＋ CoCl₂组、AAT1组、AAT1＋ CoCl₂组、scramble组、scramble ＋ SO₂组、AAT1敲低(AAT1sh)组和AAT1sh ＋ SO₂组。scramble ＋SO₂组及AAT1sh ＋ SO₂组细胞给予SO₂供体亚硫酸钠(Na₂SO₃)/亚硫酸氢钠(NaHSO₃)混合液(100 μmol/L)。应用Western blot法检测大鼠PASMCs AAT1、超氧化物歧化酶1(SOD1)和SOD2蛋白的表达。应用SO₂探针原位检测大鼠PASMCs SO₂水平。应用二氢乙啶探针(DHE)检测大鼠PASMCs超氧阴离子生成。

与vehicle组相比，vehicle ＋ CoCl₂组大鼠PASMCs SO₂水平、AAT1(0.221±0.002比0.446±0.004)、SOD1(0.076±0.028比0.171±0.019)和SOD2(0.080±0.031比0.196±0.018)蛋白表达均明显降低，差异均有统计学意义(均P<0.01)，超氧阴离子生成增多。与vehicle ＋ CoCl₂组相比，AAT1 ＋ CoCl₂组大鼠PASMCs SO₂水平、AAT1(0.839±0.056比0.221±0.002)、SOD1(0.177±0.020比0.076±0.028)和SOD2(0.195±0.018比0.080±0.031)蛋白表达均明显升高(均P<0.01)，超氧阴离子生成减少。与scramble组相比，AAT1sh组大鼠PASMCs SO₂水平、AAT1(0.062±0.017比0.354±0.034)、SOD1(0.054±0.029比0.157±0.023)和SOD2(0.180±0.100比0.586±0.176)蛋白表达均减少(均P<0.01)，超氧阴离子生成增加。与AAT1sh组相比，AAT1sh＋ SO₂组大鼠PASMCs SO₂水平、SOD1(0.155±0.022比0.054±0.029)和SOD2(0.578±0.200比0.180±0.100)蛋白表达均升高(均P<0.01)，超氧阴离子生成减少。

内源性SO₂/AAT1抑制CoCl₂诱导的大鼠PASMCs氧化应激。