【摘 要】
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目的 探讨在高脂饮食诱导ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)中及泡沫细胞形成过程是否有铁死亡发生.方法 高脂饮食诱导ApoE-/-小鼠建立AS模型;氧化低密度脂蛋白(o
【机 构】
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宁夏医科大学公共卫生与管理学院 银川750004;宁夏医科大学基础医学院 银川750004;国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室 银川750004;宁夏医科大学临床医学院 银川750004
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目的 探讨在高脂饮食诱导ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)中及泡沫细胞形成过程是否有铁死亡发生.方法 高脂饮食诱导ApoE-/-小鼠建立AS模型;氧化低密度脂蛋白(oxidized lowdensity lipoprotein,ox-LDL)干预RAW264.7巨噬细胞诱导泡沫细胞模型.全自动生化分析仪检测小鼠总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)血清水平;H&E、油红O染色观察小鼠主动脉根部斑块面积大小及脂质沉积情况;qRT-PCR与Western blot分别测定主动脉组织和泡沫细胞中P53、GPX4和SLC7A11的mRNA和蛋白表达改变;比色法检测细胞内脂质过氧化物丙二醛(malondialdehyde,MDA)、还原型谷胱甘肽(glutathione peroxidase,GSH)及 Fe2+水 平;荧光探针 DCFH-DA检测细胞内过氧化标志物活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平.结果 与对照组相比,铁死亡相关因子p53的mRNA和蛋白表达明显升高,GPX4、SLC7A11 mRNA和蛋白表达明显降低;ox-LDL诱导的RAW264.7巨噬细胞来源泡沫细胞中p53 mRNA和蛋白表达明显升高,GPX4、SLC7A11 mRNA和蛋白表达水平显著降低;脂质过氧化物ROS、MDA增多,Fe2+水平升高,GSH水平明显降低.结论 铁死亡参与高脂饮食诱导的ApoE-/-小鼠AS的形成,且ox-LDL诱导的RAW264.7巨噬细胞来源泡沫细胞中脂质过氧化和铁死亡发生增加,这提示泡沫细胞铁死亡可能与动脉粥样硬化的形成有关.
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