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目的 探索高效、安全的自分泌运动因子(autocrine motility factor,AMF)基因转染方法 ,为携带AMF基因的成肌细胞移植提供实验依据. 方法 取SD大鼠胸肌,用组织块培养法原代培养成肌细胞,纯化、鉴定、扩增成肌细胞;构建携带AMF及增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreen fluorescent protein,EGFP)基因的猫免疫缺陷病毒(feline immuneddieiency vires,FIV)慢病毒载体;后者转染至成肌细胞;用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜检测EGFP以确定转染的阳性率;应用免疫组化方法 检测AMF的表达. 结果 经过2周的原代培养及纯化,可获得纯度为98%的成肌细胞,在转染复数(multiplieity ofinfection,MOI)为100时,可获得90.4%(P<0.01)的转染阳性率,而转染后的AMF基因能正常表达. 结论 组织块培养法适合成肌细胞的原代培养;FIV载体能以高转染率将AMF基因转至大鼠成肌细胞,并获得高效的表达.该方法 为一种较理想的AMF基因转染模式。