【摘 要】
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背景：BIGH3蛋白位于角膜上皮和基质层,在基质层高表达,先前研究已经发现BIGH3蛋白能促进角膜上皮创伤愈合,为此进一步探讨其对角膜基质创伤愈合的影响。目的：构建人BIGH3基因的
【机 构】
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哈尔滨医科大学附属第一医院眼科医院,LUniversityofEastAnglia
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背景：BIGH3蛋白位于角膜上皮和基质层,在基质层高表达,先前研究已经发现BIGH3蛋白能促进角膜上皮创伤愈合,为此进一步探讨其对角膜基质创伤愈合的影响。目的：构建人BIGH3基因的原核表达载体,观察其对角膜细胞与细胞外基质黏附和迁移的作用。方法：PCR扩增BIGH3基因的ORF阅读框,并通过KpnI和SalI插入到原核表达载体pET32a（＋）中。经PCR、酶切和序列测定方法鉴定重组质粒。将重组质粒转入BL21（DE3）表达,IPTG诱导表达人BIGH3融合蛋白,并进行SDS-PAGE电泳分析和West
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