【摘 要】
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【目的】构建表达巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶（PGA）的枯草芽孢杆菌工程菌.【方法】首先采用PCR从巨大芽孢杆菌基因组DNA中扩增出长度为2 409bp的PGA编码基因,经琼脂糖凝胶电泳检
【机 构】
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甘肃农业大学食品科学与工程学院,临夏州人民医院,甘肃农业大学生命科学技术学院
【基金项目】
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甘肃省科技重大专项(1102NKDN058)
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【目的】构建表达巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶（PGA）的枯草芽孢杆菌工程菌.【方法】首先采用PCR从巨大芽孢杆菌基因组DNA中扩增出长度为2 409bp的PGA编码基因,经琼脂糖凝胶电泳检测及DNA测序验证后,再将其与枯草芽孢杆菌穿梭表达载体PMA5（7.5kb）连接后导入到枯草芽孢杆菌10397中表达,并通过聚丙烯酰胺琼脂糖凝胶电泳（SDS-PAGE）检验其能否表达.【结果】构建了9.9kb大小的PMA5-PGA重组质粒,经SDS-PAGE验证,青霉素酶基因在枯草芽孢杆菌10 397中作出表达.基因工程菌
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