【摘 要】
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为构建荷包猪SLA-2-HB01真核细胞表达载体,观察其在PK15细胞中的表达情况。首先参考SLA-2-HB01基因编码区序列设计了引物对,以SLA-2-HB01-pMD18-T为模板PCR扩增获得SLA-2-HB0
【机 构】
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大连大学生命科学与技术学院,大连医科大学基础医学院,韶关学院英东生命科学学院粤北生猪生产及疫病防控协同创新发展中心
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31672525),辽宁省教育厅重点实验室项目(LZ2015003)
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为构建荷包猪SLA-2-HB01真核细胞表达载体,观察其在PK15细胞中的表达情况。首先参考SLA-2-HB01基因编码区序列设计了引物对,以SLA-2-HB01-pMD18-T为模板PCR扩增获得SLA-2-HB01编码区基因片段,经TA克隆及菌落PCR筛选得到阳性克隆菌。测序正确后大量双酶切回收目的基因片段并与真核表达载体pEGFPN3相连接获得重组质粒SLA-2-HB01/pEGFPN3,重组质粒转化至大肠杆菌经大量克隆后,抽提阳性重组质粒并通过脂质体介导转染至PK15细胞,通过荧光显微镜观察转染后
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