【摘 要】
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目的 构建Livin靶向小干扰RNA(siRNA)重组表达载体,观察其对前列腺癌PC3细胞凋亡和增殖等生物学特性的影响. 方法 2009年1月至2012年1月,构建针对Livin基因的siRNA真核表达载体U6/GFP/Neo-Livin并转染前列腺癌PC3细胞.实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测转染后Livin基因mRNA和蛋白的表达情况,MTT法检测对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测转染后
【机 构】
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361021厦门市第二医院泌尿外科,361021厦门市第二医院泌尿外科,361021厦门市第二医院泌尿外科,361021厦门市第二医院泌尿外科,南开大学生物活性材料教育部重点实验室,天津医科大学第二医
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目的 构建Livin靶向小干扰RNA(siRNA)重组表达载体,观察其对前列腺癌PC3细胞凋亡和增殖等生物学特性的影响. 方法 2009年1月至2012年1月,构建针对Livin基因的siRNA真核表达载体U6/GFP/Neo-Livin并转染前列腺癌PC3细胞.实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测转染后Livin基因mRNA和蛋白的表达情况,MTT法检测对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测转染后细胞的凋亡效应以及对细胞周期的影响,克隆形成实验观察对细胞体外克隆形成能力的改变,体内成瘤实验比较细胞在裸鼠体内成瘤性的变化. 结果 Livin靶向siRNA重组表达载体转染PC3细胞后,与对照组相比,实验组细胞内Livin mRNA和蛋白的表达水平分别下调至(31.55±3.92)％、(0.37±0.02)％(P＜0.01)；与对照组相比,PC3细胞增殖受到显著抑制(P＜0.01)；细胞凋亡率增到(26.5±3.3)％(P＜0.01)；Caspase3活性增至0.079±0.017 (P＜0.05),体外克隆形成率降至(34.8±3.5)％(P＜0.01).实验组和对照组荷瘤裸鼠的成瘤体积分别为(1.79±0.07)、(4.40±0.06) cm3(p＜0.01). 结论 靶向Livin基因的siRNA干扰了前列腺癌PC3细胞中Livin基因的表达,抑制了细胞增殖并诱导其凋亡,延缓了肿瘤细胞的生长。
其他文献
目的 探讨应用股前外侧岛状皮瓣联合自体中厚皮片游离移植修复阴茎阴囊广泛Paget病切除后大面积皮肤缺损的疗效.方法 回顾性分析2005年2月至2010年10月收治的6例阴茎阴囊广泛Paget病患者的临床资料.年龄55～68岁,平均64岁 查体及B超、CT等辅助检查未发现其他恶性肿瘤存在,腹股沟未触及肿大淋巴结.患者均在硬膜外麻醉下接受扩大病灶切除术,切除范围超过病变边缘2 cm,用股前外侧岛状皮瓣
目的 探讨电针阴部神经刺激疗法治疗女性压力性尿失禁的临床疗效和作用机制.方法 2006年5月至2008年4月35例女性压力性尿失禁患者纳入本研究.患者年龄(54.9±9.7)岁；病程(74.1±45.6)个月；最大尿道关闭压(63.7±15.9)cm H2O(1 cm H2O=0.098 kPa),尿道功能长度(2.34±0.72) cm,膀胱颈移动度(1.23±0.76) cm.于双侧骶骨边缘旁
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目的 总结继发性输尿管霍奇金淋巴瘤的临床病理特点、诊断、鉴别诊断、治疗方法及预后. 方法 回顾性分析1例腹膜后霍奇金淋巴瘤侵及右输尿管患者的资料,男,63岁.因便秘、排便困难行腹部彩色多普勒超声检查发现右肾积水15 d于2013年1月22日入院.患者无泌尿系统症状主诉.泌尿系CT检查:右侧肾盂及输尿管中上段积水扩张,右侧输尿管下段管壁增厚、管腔狭窄,腹主动脉周围多发肿大淋巴结,考虑为输尿管癌并淋巴
患者,男,出生于1959年9月.2003年4月3日B超及CT检查见左肾上极实质占位,恶性肿瘤可能.于2003年4月14日行左肾根治性切除术,术中见肿瘤位于左肾中上部,完整切除患肾、患侧肾上腺及周围脂肪组织,见肿瘤大小约8.0 cm×7.5 cm,已突破肾盂.病理检查提示左肾肾细胞癌,透明细胞型,肾门血管未见癌栓,肾上腺未见癌累及(图1A).患者术后定期随访.2009年患者无明显诱因出现间歇性头痛,
目的 评价经直肠自然腔道内镜手术(NOTES)辅助腹腔镜下肾切除术猪动物模型的应用价值. 方法 健康雌性普通猪6只,质量42～48 kg,中位质量46 kg.行经直肠NOTES辅助腹腔镜下肾切除术,左侧3例,右侧3例.全麻.取70°侧卧位,双后肢外展固定.于脐两侧缘分别置入5 mm和10 mm套管,距齿状线上方约2 cm处置入5 mm套管.自直肠套管置入腹腔镜,脐缘两套管置入操作器械.用电凝钩和吸
由国际尿控协会(ICS)主办,中华医学会、中华医学会泌尿外科学分会和妇产科学分会联合承办的第42届ICS年会于2012年10月17-19日在国家会议中心举行.这是ICS首次在中国、第三次在亚洲举办年会.现就本次会议的学术内容作简要报道.一、膀胱过度活动症(OAB)辩论会2012年是ICS提出OAB定义10周年,OAB概念自从问世以来即争论不断.OAB概念的提出者之一Wein首先做了"OAB:好、坏
目的 提高对上尿路菌栓的认识,探讨其临床诊治方法. 方法 回顾性分析2005年3月至2012年9月收治11例上尿路菌栓患者的临床资料,总结其临床表现及治疗要点. 结果 11例患者均分期处理,一期经皮肾穿刺造瘘或逆行放置双J管减压引流,二期10例行经皮肾镜取栓,1例行经尿道输尿管镜取栓.二期手术时间20～ 55 min,平均37 min;术中出血10 ～ 200 ml,平均60 ml;10例经皮肾镜
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