研究Smac基因在乳腺癌细胞株MCF-7中对化疗药物环磷酰胺(CTX)和多柔比星(DOX)化疗敏感性的影响。
方法分别用化疗药物CTX、DOX及二者联合处理乳腺癌细胞株MCF-7，用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法分析细胞生存率，吖啶橙染色和Ho.33342/PI双染法检测细胞凋亡，RT-PCR和Western blotting检测Smac的mRNA和蛋白水平，并进一步分析促凋亡蛋白活性caspase-3和活性caspase-9的表达变化。
结果CTX、DOX及二者联合应用降低了MCF-7细胞的生存率，并且呈浓度依赖性。4.0 μg/ml CTX、0.2 μg/ml DOX及2.0 μg/ml CTX联合0.1 μg/ml DOX处理细胞48 h后，细胞生存率分别是(52.90±8.78)%、(53.35±6.29)%和(34.19±5.43)%。与4.0 μg/ml CTX、0.2 μg/ml DOX相比，联合用药有更强的抑制细胞生长作用(t＝9.051，P＝0.014；t＝9.074，P＝0.014)。2.0 μg/ml CTX联合0.1 μg/ml DOX处理细胞48 h后，Smac的mRNA和蛋白水平分别为7.47±0.82和4.13±0.36，4.0 μg/ml CTX组分别为3.27±0.40(t＝－50.120，P＝0.000)和2.28±0.27(t＝－42.588，P＝0.000)，0.2 μg/ml DOX组分别为3.34±0.62(t＝－46.233，P＝0.000)和2.45±0.40(t＝－39.541，P＝0.000)，与单一用药相比，联合用药后Smac在mRNA和蛋白水平上都明显升高。同时发现活性caspase-3和活性caspase-9的蛋白表达水平也明显升高。
结论Smac在提高乳腺癌细胞株MCF-7对CTX和DOX化疗敏感性中发挥了重要作用。