阿司匹林丁香酚酯对LPS诱导的Caco-2细胞炎症的作用效果对比

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旨在探讨阿司匹林丁香酚酯(aspirin eugenol ester, AEE)对Caco-2细胞炎症模型的预防、保护和治疗作用。在体外,采用响应面法优化脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导Caco-2细胞炎症模型的浓度和作用时间;培养Caco-2细胞,采用CCK-8法检测细胞活力;ELISA法测定白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的分泌量;考察AEE对该模型的预防、保护和治疗作用,及其与前体药物阿司匹林(aspirin, ASP)和丁香酚(eugenol, EUG)的区别。结果显示,LPS的质量浓度在0.3~25 mg/L时,细胞活力随着质量浓度的增加而增加,说明在此范围内LPS对Caco-2细胞活力有促进作用;随着LPS质量浓度的继续增加,细胞活力呈一定的下降,但细胞活力仍在95%以上。AEE和ASP这2种药物在所选的浓度范围内对Caco-2细胞活力的影响较小,没有显著性差异(P>0.05),但EUG和ASP+EUG(1∶1,物质的量比)在浓度256μmol/L时,对Caco-2细胞活力有显著影响(P<0.01);由响应面优化分析得到IL-1β、TNF-α和IL-6分泌量的最佳条件为LPS质量浓度100 mg/L,LPS作用时间24 h,在此条件下,预测IL-1β、TNF-α和IL-6能有最大分泌量;AEE高浓度组(32μmol/L)的细胞因子水平低于AEE低、中浓度组。3种作用方式比较后发现,AEE在治疗条件下,细胞因子水平最低,而且AEE治疗后细胞因子水平均低于其前体化合物治疗后细胞因子水平。结果表明,AEE作用于Caco-2细胞炎症模型时,呈现一定的浓度依赖性。AEE可通过抑制Caco-2细胞炎性介质的形成,显著减少IL-1β、TNF-α和IL-6细胞因子的表达与分泌,缓解炎症反应,且AEE的治疗效果要显著优于其前体化合物(P<0.01);AEE对Caco-2细胞炎症模型的治疗作用优于预防和保护作用(P<0.05)。
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