【摘 要】
：
目的 以RAW264.7细胞为研究对象,采用脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞建立体外炎症模型,探究芦荟大黄素衍生物AE-YJ的抗炎活性及作用机制.方法 MTT法测定RAW264.7细胞活力;Griess法检测RAW264.7细胞的NO释放量;ELISA法检测RAW264.7细胞培养上清液中PGE2、TNF-α、IL-6和IL-1β含量;RT-PCR检查IL-6、IL-1β和COX-2的mRNA表达;Western blot法检测RAW264.7细胞中iNOS、COX-2、IκBα、p65、Akt、
【机 构】
：
贵州医科大学基础医学院,贵阳 贵州 550025;中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所,北京 100193
论文部分内容阅读
目的 以RAW264.7细胞为研究对象,采用脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞建立体外炎症模型,探究芦荟大黄素衍生物AE-YJ的抗炎活性及作用机制.方法 MTT法测定RAW264.7细胞活力;Griess法检测RAW264.7细胞的NO释放量;ELISA法检测RAW264.7细胞培养上清液中PGE2、TNF-α、IL-6和IL-1β含量;RT-PCR检查IL-6、IL-1β和COX-2的mRNA表达;Western blot法检测RAW264.7细胞中iNOS、COX-2、IκBα、p65、Akt、ERK、JNK和p38的蛋白表达;免疫荧光法检查p65蛋白的核易位情况.结果 相同等剂量下,AE-YJ显示出比AE更强的抗炎活性;AE-YJ减少炎症介质(NO、PGE2、TNF-α、IL-6 IL-1β)的产生,降低iNOS和COX-2的蛋白表达,发挥抗炎活性.AE-YJ减少Akt的磷酸化,降低IκBα降解和p65核易位,阻碍NF-κB的活化;此外,AE-YJ还降低MAPK途径中ERK、JNK、p38的磷酸化.结论 AE-YJ的抗炎活性优于AE,其作用机制可能是通过抑制PI3K-Akt/NF-κB和MAPK/NF-κB途径减少LPS诱导的RAW264.7细胞中炎症介质的产生.
其他文献
在肿瘤的发生、发展及转移过程中,肿瘤细胞经历的缺氧、低糖、酸中毒等应激环境,使肿瘤细胞发生内质网应激,内质网应激启动未折叠蛋白反应使细胞恢复稳态;但当内质网应激超过细胞的存活能力时,则会介导细胞凋亡.该文主要从抑制未折叠蛋白反应介导的促生存通路和诱导持续的内质网应激介导的促死亡通路两个方面,阐述了内质网应激在抗肿瘤治疗中的作用及研究进展,以深入了解内质网应激相关途径与抗肿瘤治疗的关系,希望能为肿瘤治疗提供新思路.
重度抑郁症(major depressive disorder,MDD)致残率高,自杀风险大.基于单胺假说的传统抗抑郁药物疗效有限,为解决临床需求,研究者们积极开发多种不同机制的动物模型.近年来,伴随着基因工程和分子生物学技术的快速发展,重度抑郁症动物模型研究也有了不小的进展,该文对较为常用的啮齿类动物模型进行总结,对其原理和制备方法、表型特征、模型有效性(对临床MDD的模拟性)以及其优缺点进行综述,旨在为研究者选择合适的动物模型探索MDD的发病机制,进行抗MDD新药研发.
目的 研究胡椒碱(piperine,PIP)对高脂喂养的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的治疗效果及作用机制.方法 灌胃给予小鼠PIP 20周后,主动脉进行油红O染色并统计斑块面积;测定血脂及炎症因子水平,并检测肝组织中氧化应激相关蛋白的表达.培养人脐静脉内皮细胞(HU-VECs),LPS诱导后给予系列浓度的PIP,测定NO和脂质氧化水平,检测PI3K/Akt/eNOS信号通路相关因子水平.结果 与对照组相比,PIP明显降低ApoE-/-小鼠血清中甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、TNF-α和CRP的水平,明显
肿瘤血管和淋巴管生成是肿瘤生长、进展和转移的必要条件,且血管生成与肿瘤浸润免疫细胞息息相关.一方面,免疫细胞依赖于血管内皮细胞上的黏附分子而渗入肿瘤组织,并在其中表现出抗肿瘤的特性.另一方面,免疫细胞可以通过分泌趋化因子和细胞因子等多种途径调节肿瘤血管和淋巴管生成,因而其在肿瘤血行转移过程中起重要作用.此外,免疫细胞促肿瘤血行转移的作用凸显出了抗血管生成疗法的不足之处,所以就免疫细胞和血管新生之间的联系,同时靶向免疫细胞和肿瘤新生血管可以提高治疗效果.基于此,该文对肿瘤转移中免疫细胞对血管和淋巴管的作用以
目的 探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的血管外膜成纤维细胞(vascular adventitial fibroblasts,VAFs)迁移的作用.方法 组织法培养SD大鼠VAFs,细胞分为正常组、AngⅡ组、HSYA组、HSYA与自噬抑制剂Bafilomycin A1共处理组、Bafilomycin A1组;采用免疫荧光实验鉴定VAFs;CCK-8法分别建立AngⅡ和HSYA的量效时效曲线;划痕实验检
目的 探究CysLT1 R对APP-HEK293细胞中Aβ生成的影响并探寻其可能的作用机制.方法 构建慢病毒载体LV-CysLT1 R-EGFP并转染APP-HEK293细胞,激动剂YM17690单独处理或拮抗剂普仑司特和YM17690共同处理细胞,采用ELISA检测Aβ;Western blot检测APP、BACE1、PS1、PS2;细胞免疫荧光和Western blot检测CysLT1 R和NF-κB p65在细胞的分布.转染clathrin、β-arrestin-2、Rab-5、siR-NA;Co-
目的 探讨白藜芦醇苷(piceid,PD)通过MAPK和Nrf2/HO-1通路减轻脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)引起的炎症反应的相关机制.方法 采用MTT法测定PD在RAW264.7细胞中的细胞毒性,流式细胞术与蛋白印迹检测PD对于炎症反应的影响,流式分析与ELISA检测PD处理后炎症因子水平的影响,采用蛋白印迹检测PD对于MAPK和Nrf2/HO-1通路以及Keap1-Nrf2信号通路的影响,采用免疫荧光法和细胞内ROS试剂盒检测细胞内ROS的产生,利用免疫荧光检测其对于线粒体
目的 研究TGF-β1调控Cdk5表达在人肾系膜细胞外基质沉积中的作用.方法 10μg·L-1的TGF-β1刺激体外培养的人肾小球系膜细胞(HMC),检测其对系膜细胞Cdk5、p35/p25表达的影响;转染Cdk5过表达质粒,Western blot、免疫荧光检测胶原蛋白FN、CollagenⅣ表达的变化;应用Cdk5激酶活性抑制剂Roscovitine或转染Cdk5干扰质粒,Western blot、Real time-PCR、免疫荧光检测抑制Cdk5对TGF-β1刺激HMC后FN、CollagenⅣ蛋
目的 研究在Chidamide抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞生长中,LncRNA ENST00000448869.1靶向调控Nestin对细胞生长的影响.方法 以人乳腺癌MDA-MB-231细胞为研究对象,通过高通量测序进行RN A文库筛查及测序比对分析,筛选经Chidamide处理后存在差异表达的LncRNA;利用蛋白互作生物学软件推测与该LncRNA互作的蛋白质;Muse细胞分析仪检测Chidamide对细胞活力的影响;Real-time PCR和Western blot检测Chidamide作用
目的 研究大车前苷(plantamajoside,PMS)对氧嗪酸钾盐(postassium oxonate,OA)诱导急性高尿酸血症模型小鼠的影响及其作用机制.方法 选取60只小鼠,随机均分为正常组,模型组,阳性组,PMS低、中、高剂量组.腹腔注射OA造成实验所需模型,连续灌胃给药7 d,于造模完毕1 h之后各组小鼠眼眶采血、取肝脏及肾脏,测定血清中尿酸等生化指标含量,通过Western blot检测小鼠肾组织有机阴离子转运体(OAT1)等蛋白表达水平.结果 与正常组相比,模型组小鼠血清中尿酸等生化指标