【摘 要】
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采取正交试验法优化山药总蛋白提取工艺，并验证其稳定性，采用氨基酸自动分析仪测定山药总蛋白的氨基酸含量。建立氢化可的松所致肾阳虚大鼠模型，观察山药总蛋白对大鼠状态、睾丸指数、附睾指数、精子数量及精子活力、睾酮分泌量、睾丸间质细胞含量的影响。同时利用过氧化氢体外建立TM3细胞氧化应激模型，探讨山药总蛋白对大鼠睾丸损伤后生精功能的修复作用。试验结果表明，山药总蛋白最佳提取工艺是以20 mmol/L Tr
【机 构】
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长春中医药大学吉林省人参科学研究院
【基金项目】
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吉林省中药生物技术重点实验室（20140622003JC）；
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采取正交试验法优化山药总蛋白提取工艺，并验证其稳定性，采用氨基酸自动分析仪测定山药总蛋白的氨基酸含量。建立氢化可的松所致肾阳虚大鼠模型，观察山药总蛋白对大鼠状态、睾丸指数、附睾指数、精子数量及精子活力、睾酮分泌量、睾丸间质细胞含量的影响。同时利用过氧化氢体外建立TM3细胞氧化应激模型，探讨山药总蛋白对大鼠睾丸损伤后生精功能的修复作用。试验结果表明，山药总蛋白最佳提取工艺是以20 mmol/L Tris-HCl（pH7.4）为提取液，料液比（w/v）1:10，浸提2 h，硫酸铵饱和度65%，验证试验RSD值为2.89%，小于3%，山药总蛋白平均收率为2.12%，山药总蛋白能提高肾阳虚大鼠体重及脏器指数，增强精子活力，促进睾酮分泌，增加睾丸间质细胞含量并提高p-ERK/ERK和p-AKT/AKT表达量。这说明优化后的山药总蛋白提取工艺稳定可行且山药总蛋白中富含多种氨基酸。同时山药总蛋白能通过激活ERK及AKT信号途径的相关蛋白恢复睾丸间质细胞活力及功能，从而有效改善大鼠睾丸功能，修复其生精能力。
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