【摘 要】
：
目的 以GPR56-G蛋白融合传感器为例，建立一种检测GPCR与G蛋白相互作用的高灵敏方法。方法 将带有NanoLuc荧光素酶（Nluc）的G蛋白α亚基的N端融合到GPCR的C端，构建GPCR和G蛋白α亚基两者的融合蛋白为实验组，受体和G蛋白共表达作为对照组。在受体表达水平相同的条件下，利用生物发光共振能量转移（BRET）方法检测GPR56-Gα12亚基融合蛋白、GPR56和Gα12亚基共表达的组
【基金项目】
：
国家自然科学基金（81773704,81901548）； 国家杰出青年科学基金（81825022）； 山东省自然科学基金（ZR2019BC078）；
论文部分内容阅读
目的 以GPR56-G蛋白融合传感器为例，建立一种检测GPCR与G蛋白相互作用的高灵敏方法。方法 将带有NanoLuc荧光素酶（Nluc）的G蛋白α亚基的N端融合到GPCR的C端，构建GPCR和G蛋白α亚基两者的融合蛋白为实验组，受体和G蛋白共表达作为对照组。在受体表达水平相同的条件下，利用生物发光共振能量转移（BRET）方法检测GPR56-Gα12亚基融合蛋白、GPR56和Gα12亚基共表达的组成性活力。利用BRET方法检测GPR56激动剂（P19）对GPR56-Gα12亚基融合蛋白相互作用的影响。结果 BRET比率结果显示，与对照组GPR56和Gα12亚基共表达相比，GPR56-Gα12亚基融合蛋白具有更强的组成性活力（F=424.7,P＜0.001）;与对照组比较，P19激活实验组的半数有效浓度(EC50)下降，差异有统计学意义（t=13.36,P＜0.001）,GPR56-Gα12亚基融合蛋白对激动剂（P19）的感知更灵敏，亲和力更强。结论 GPCR-Gα亚基融合蛋白系统是一种检测GPCR与G蛋白相互作用更灵敏的方法。
其他文献
“思辨性阅读与表达”任务群是《义务教育语文课程标准（2022年版）》新增课程内容之一。本文就其概念内涵、课程意义、编排特点及实施路径予以详细阐述，提出以“读写融合”为基本路径，寻找读写共享策略知识，实施“思辨性阅读与表达”任务群的语言建构与运用。
近两年,小微企业发展壮大成为政府关注关心的重点领域,政府要求金融机构要善于使用自身金融功能帮助我国小微企业获得应有的资本扶持,发挥能力作用,因此银行需要应进一步优化小微企业信贷业务,以科学管理为手段,及时研发适合小微企业发展需要的新型产品,不断完善相关产品、信贷、服务流程,更好地提升小微企业信贷服务能力,满足小微企业的融资需求,一方面为商业银行增加新的盈利点,另一方面又可以促进小微企业发展,增进社
设计一种基于ESP32模块的畜场环境云上监控系统。系统包括传感器模块、ESP32联网控制模块和输出模块。输出模块包含与ESP32模块直接连接获取数据的LCD屏幕及从云端获取数据并显示的UI界面两个部分。系统能够自主采集畜场内环境温湿度和氨气、硫化氢等多种对动物生长发育有害的气体，并通过Wi-Fi网络将数据进行云端上传，在电脑（PC）端设计了基于Grafana平台的UI界面。测试表明，系统数据采集上
在最佳的时间和成本内完成施工活动在建设项目中起着重要的作用。为了提高工程项目管理水平，优化项目工期—成本目标，构建了基于粒子群算法的项目工期—成本优化体系。通过利用BIM技术信息化建模和动态模拟功能，结合WBS技术对项目进行分解，能够快速准确地确定项目施工工序、各工序工期—成本等数据，在此基础上分析项目工期和成本间的关系建立了工期—成本优化模型，并采用粒子群智能算法求解模型，来解决项目中工期—成本
在小学美术教学中，将中国画教学和创作儿童画、参与小游戏、古诗词赏析、讲述古代故事、展开户外活动等结合，能达到多元拓展的效果，有助于学生开阔视野、提升创作兴趣、感受中华优秀传统文化的魅力，提升中国画创作整体水平。
新课程改革以来，初中英语教师始终在探索有助于提升阅读教学效率与教学质量的教学策略，问题教学法便是其中之一，并在当前环境下得到了较为广泛的应用。本文对初中英语阅读教学中问题教学法的应用策略展开了分析，先对其“保障高效教学”作用进行了说明，后根据教学实例提出了在导课中以问题驱动教学、教师发挥主导作用建构问题情境、着眼阅读逻辑以问题激发学生阅读兴趣等问题教学法应用建议，旨在为教师教学打开新的思路。
在教育改革之后,对于初中的语文阅读越来越重视了,开始对学生进行初中语文阅读培养,用三位一体的教学体系对学生进行阅读教学,三位一体的教学模式,即教读、自读、课外阅读,三个结合起来的教学模式,学生能够提高阅读能力,加强阅读技能,掌握阅读技巧,教师要根据学生的实际情况选择合适的教学方法与教学模式,教师首先要重视学生的阅读,知道阅读对于学生的重要性,同时知道阅读是语文课程的一大重点,激发学生阅读的兴趣。本
随着社会经济不断发展,旅游业也逐渐成为一种生命力旺盛的经济发展形式,成为了我国经济收入来源的重要组成部分。主题公园是一种以游乐为目标的模拟景观的多元化呈现,能够满足游客休闲娱乐的需求和选择。我国主题公园较西方发达国家起步较晚,但进入21世纪后,进入快速发展阶段。近年来随着国外主题公园巨头的进驻,主题公园全球化竞争格局已经在本土拉开序幕。主题公园投资数额巨大,投资周期较长,在项目实施前,若能做好充分
目的:本研究从温阳通督立法,通过观察艾条温针灸法与艾段温针灸法在治疗神经根型颈椎病时的疗效差异,并探讨艾条温针灸法治疗该病时所激发的感传在治疗中所起的作用,以期为临床治疗该病提供一种新的温针灸疗法。方法:本研究所纳入的60例神经根型颈椎病病例,均来自江西中医药大学附属医院。本研究采用平行对照、随机分组的设计方法。按1:1分配,将60例神经根型颈椎病入组病例分为艾条温针灸法组（简称试验组）30例,艾
近年来，物联网行业蓬勃发展，许多家具被赋予了联网的功能。仅需一个APP，用户便可实现远程操控家具，给生活带来了极大的便利。百叶窗作为一种常见家居装饰，在家室中占据重要地位，但是传统百叶窗智能化程度不足，不能根据环境自我调节，用户对百叶窗的控制方式较为原始。本设计为传统百叶窗增加了联网功能以及温湿度信息采集功能，致力于提高百叶窗智能化程度。同时加入语音控制，基于激光测距的手势控制，在控制方式上做出创