羽衣甘蓝S13-b位点受体激酶基因的克隆及激酶结构域的原核表达

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chouchouzhuzhu
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目的:分离羽衣甘蓝S13-b位点受体激酶(SRK13-b)基因并进行序列及结构域分析,构建SRK13-b结构域的原核表达载体并进行重组蛋白质的原核表达和纯化。方法:提取羽衣甘蓝S13-bS13-b自交不亲和系花期柱头的RNA,用RT-PCR法分离SRK13-b基因;将编码SRK13-b激酶结构域的序列插入大肠杆菌表达载体pET-14b中,构建原核表达质粒pET-SRK13-bCT,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS菌株,经0.1mmol/L IPTG诱导,用Ni—NTA亲和层析柱对SRK13-b激酶
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