【摘 要】
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本研究利用重组质粒pCZS转化大肠杆菌,制备出人重组Cu-Zn超氧化物歧化酶(rhCuZn-SOD),进一步建立了3株鼠抗rhCuZnSOD的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株。经鉴定,它们分泌的McAb分别属于IgG1和IgG2a亚类,能特异性地识别人CuZnSOD,与pCZS空载菌蛋白无交叉反应。将此McAb制备了免疫亲和层析柱,从大肠杆菌的粗提液中纯化出rhCuZnSOD,SDS-PAGE显
【机 构】
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100037 北京,海军总医院分子生物学研究室,100037 北京,海军总医院分子生物学研究室,100037 北京,海军总医院分子生物学研究室,100037 北京,海军总医院分子生物学研究室,1000
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本研究利用重组质粒pCZS转化大肠杆菌,制备出人重组Cu-Zn超氧化物歧化酶(rhCuZn-SOD),进一步建立了3株鼠抗rhCuZnSOD的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株。经鉴定,它们分泌的McAb分别属于IgG1和IgG2a亚类,能特异性地识别人CuZnSOD,与pCZS空载菌蛋白无交叉反应。将此McAb制备了免疫亲和层析柱,从大肠杆菌的粗提液中纯化出rhCuZnSOD,SDS-PAGE显示单一条带,纯度>98%,回收率50%,酶比活达10971.3U/mg蛋白。rhCuZnSOD-McAb的制备为CuZnSOD产品的纯化和抗辐射等应用研究提供了有效的工具。
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