【摘 要】
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应用RT-PCR技术,从分泌具有中和活性的抗A型产气荚膜梭菌(CPA)α毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞中,扩增出单链抗体(ScFv)基因,并将其定向克隆于表达载体pHOG21中,构建重组表达载
【机 构】
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河北师范大学生命科学学院,解放军军需大学军事兽医研究所
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应用RT-PCR技术,从分泌具有中和活性的抗A型产气荚膜梭菌(CPA)α毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞中,扩增出单链抗体(ScFv)基因,并将其定向克隆于表达载体pHOG21中,构建重组表达载体pHOG-2E3,转化至大肠杆菌XL1-Blue中,筛选出表达菌株XL1-Blue(pHOG-2E3).SDS-PAGE分析结果表明,在20℃用IPTG诱导培养时,表达的ScFv蛋白占菌体总蛋白的25%,ScFv蛋白主要以包涵体的形式存在,但在胞周质和培养上清中也能检测到ScFv蛋白,其中在胞周质中表达的ScFv蛋白占
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