【摘 要】
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旨在建立一种用于牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus，BVDV）的特异、灵敏、快速、简便的检测方法。试验利用环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification LAMP）与横向流动层析试纸（lateral flow dipstick，LFD）相结合的技术，根据BVDV 5’UTR序列保守区段设计4条LAMP特异性引物
【基金项目】
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青年教师国家自然科学基金培育项目建议资助项目（黔科合平台人才[2017]5788-70）； 贵州大学引进人才科研项目（贵大人基合字[2015]33）； 贵州省科技计划项目（黔科合支撑[2018]2265）； 贵州省2016年科学技术基金（黔科合基础[2016]1048）；
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旨在建立一种用于牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus，BVDV）的特异、灵敏、快速、简便的检测方法。试验利用环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification LAMP）与横向流动层析试纸（lateral flow dipstick，LFD）相结合的技术，根据BVDV 5’UTR序列保守区段设计4条LAMP特异性引物和1条异硫氰酸荧光素标记的DNA探针，再利用LFD检测扩增产物。通过对反应温度、反应时间、内外引物浓度比、Bst DNA 2.0聚合酶浓度、dNTP Mix浓度、Mg2+浓度等优化后对该方法的特异性及检测灵敏度进行分析并对52份临床样本进行检测，建立了检测BVDV的LAMP-LFD方法。结果显示：LAMP-LFD可特异性检测BVDV，而口蹄疫病毒、牛流行热病毒、牛疱疹病毒1型等均未检出。LAMP-LFD的敏感性较高，对pUC57-5’UTR质粒最低检测浓度为1.9×101 拷贝/μL。LAMP-LFD与PCR两种检测方法均检测出5份阳性，符合率为100%。本试验成功建立了用于BVDV快检测的LAMP-LFD方法，该检测方法检测时间短，特异性强，操作简单，灵敏性高，可作为一种新型检测方法应用于基层检测。
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