【摘 要】
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目的研究N端截短的视网膜母细胞瘤基因(Rb66)对骨肉瘤细胞Saos-2生长的影响.方法构建携带Rb66cDNA片段的真核细胞表达载体pcDNA3-1-Rb,用脂质体LIPOFECTAMIMETM2000将真核表
【机 构】
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510089,广州,中山大学中山医学院病理教研室;广州市第一人民医院检验科
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目的研究N端截短的视网膜母细胞瘤基因(Rb66)对骨肉瘤细胞Saos-2生长的影响.方法构建携带Rb66cDNA片段的真核细胞表达载体pcDNA3-1-Rb,用脂质体LIPOFECTAMIMETM2000将真核表达载体pcDNA3-1-Rb、空载体对照pcDNA3-1转染至SaOS-2细胞中.RT-PCR及免疫细胞化学检测转染后SaOS-2中Rb66mRNA及蛋白的表达;观察细胞形态的改变;测定细胞倍增时间及生长曲线的改变;流式细胞仪检测对细胞周期的影响.结果成功地将N端截短的Rb66cDNA导入骨肉瘤细胞SaOS-2中,并在mRNA及蛋白水平获得了表达.转染后的SaOS-2细胞胞浆展开,细胞核浆比例变小;Rb66导入后,SaOS-2细胞生长减慢,群体倍增时间延长,细胞周期呈现G1期阻滞.结论Rb66可通过阻止细胞G,→S期进展而抑制骨肉瘤细胞SaOS-2的增殖.
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