【摘 要】
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目的 研究脐带间充质干细胞凋亡囊泡（apoptotic extracellular vesicles of umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSC-ApoEVs）能否促进2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）小鼠拔牙创愈合并探讨其机制。方法通过星胞菌素诱导UCMSCs凋亡，将提取的UCMSC-ApoEVs（PBS悬液
【基金项目】
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国家自然科学基金（81970954）； 国家重点研发计划（2021YFA1100600）；
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目的 研究脐带间充质干细胞凋亡囊泡（apoptotic extracellular vesicles of umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSC-ApoEVs）能否促进2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）小鼠拔牙创愈合并探讨其机制。方法通过星胞菌素诱导UCMSCs凋亡，将提取的UCMSC-ApoEVs（PBS悬液）用于T2DM小鼠拔牙创（T2DM+ApoEVs组，db/db小鼠28只）；另设置正常组（db/m小鼠28只）和T2DM组（db/db小鼠28只），拔牙创注入等量PBS。应用体视显微镜、Micro CT、HE染色等方法评估拔牙创愈合情况，通过免疫荧光染色、实时荧光定量PCR检测拔牙创愈合过程中炎症小体核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（nucleotide binding oligomerization domainlike receptor protein 3,NLRP3）、半胱氨酸蛋白酶（Caspase）-1、Gasdermin家族蛋白D（GSDMD）、白细胞介素（interleukin,IL）-1β、IL-18等巨噬细胞焦亡相关指标。结果 T2DM组小鼠拔牙创黏膜愈合和新骨形成速率均显著低于正常组小鼠，最终愈合的骨体积分数（BV/TV）、骨小梁厚度（Tb.th）、骨小梁数目（Tb.N）显著下降，黏膜下层炎细胞浸润明显（P ＜0.05）;T2DM+ApoEVs组小鼠拔牙创黏膜愈合和新骨形成均较T2DM组显著加速，BV/TV、Tb.th、Tb.N显著上调，炎细胞浸润减轻，差异均具有统计学意义（P ＜0.05）。免疫荧光结果显示，3组小鼠拔牙创新生骨周围均存在明显的NLRP3、激活态Cleaved Caspase-1、GSDMD与巨噬细胞标志物F4/80共定位；T2DM组焦亡蛋白相对荧光强度高于正常组，而T2DM+ApoEVs组较T2DM组明显下调（P ＜0.05）。实时荧光定量PCR结果显示，T2DM组拔牙创内的NLRP3、GSDMD以及IL-1β、IL-18的mRNA表达水平较正常组明显增高，而T2DM+ApoEVs组较T2DM组明显下调（P ＜0.05）。结论 UCMSC-ApoEVs可通过抑制巨噬细胞焦亡减轻炎症，最终促进T2DM小鼠拔牙创黏膜及骨愈合。
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