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摘要 生物安全三级实验室的实验活动必须进行生物风险评估生风险控制，该文结合实验室风险评估和控制，对实验室内可能出现的生物危害物质溢洒情况进行评估，并提出风险因子的控制措施，建立了生物危害物质溢洒处理方法。
关键词 实验室生物安全；生物风险；溢洒处理
中图分类号 S855.3 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2013）02-0263-01
生物安全三级实验室生物危害物质溢洒处理方法是在生物风险评估的基础上建立起来的[1]，该文建立的生物危害物质溢洒处理方法是基于高致病性禽流感试验活动的，而且经过充分的生物风险分析和评估，是对风险控制方法的具体阐述，旨在给读者提供一种风险控制的思路和方法。但不同实验室的硬件条件、管理体系文件及实验活动内容等各有差异，具体的处理方法应该根据实验室的实际情况而定。
该文中溢洒指包含生物危险物质的液态或固态物质意外地与容器或包装材料分离的过程。该文仅考虑了生物安全三级实验室生物危险物质溢洒的常规处理方法，如果溢洒物中含有放射性物质或危险性化学物质，则应使用特殊的处理程序。
1 溢洒处理工具箱
生物安全三级实验室应备有溢洒处理工具箱，里面放有盛放0.5%过氧乙酸消毒液的容器（注意消毒液必须在有效期内使用）、盛放75%乙醇的容器、镊子、刷子、可高压灭菌的扫帚和簸箕、不锈钢耐扎废物桶、医用纱布、用于盛放感染性溢洒物以及清理物品的专用收集袋或容器、橡胶手套、面部防护装置或全身防护装置、写有“禁止进入”或“生物危险”的溢洒处理警示标识以及其他专用工具。溢洒处理工具箱外部应贴有“溢洒处理工具箱”的标识字样，存放在工作区的墙角[1]。
2 撤离房间
发生生物危险物质溢洒时，应立即通知房间内的无关人员迅速离开，在撤离房间的过程中注意防护气溶胶。关门并张贴“禁止进入”、“溢洒处理”的警告标识。撤离人员按照离开实验室的程序脱去个体防护设备，用适当的消毒剂和水清洗暴露在外的皮肤。如果同时发生了针刺或扎伤，可以用75%乙醇和水清洗受伤区域，挤压伤处周围以促使血往伤口外流；如果发生了黏膜暴露，用水至少冲洗暴露区域15 min。如果没有发生针刺或扎伤等意外情况，则按规定清理完溢洒物后才撤离房间，并立即向实验室安全负责人报告。必要时由实验室安全负责人安排专人清除溢洒物[2]。
3 溢洒区域的处理
采用专门清理工具和物品对溢洒区域进行处理。用0.5%过氧乙酸浸湿的纱布覆盖溢洒物，小心从外围向中心倾倒适量0.5%过氧乙酸消毒剂，使其与溢洒物混合并作用30 min。之后小心地将吸收了溢洒物的纱布收集到专用的套有收集袋的容器中，并反复用新的纱布将剩余物质吸净。破碎的玻璃或其他锐器要用镊子处理。用0.5%过氧乙酸消毒剂清洁被污染的表面。所处理的溢洒物以及处理工具（包括收集锐器的镊子等）全部置于专用的收集袋或容器中并密封好。用0.5%过氧乙酸擦拭可能被污染的区域。按相关規定处理清除溢洒物过程中形成的所有废物[3]。
4 生物安全柜内溢洒的处理
如在生物安全柜内发生生物危险物质溢洒，处理溢洒物时不要将头伸入安全柜内，也不要将脸直接面对前操作口，而应处于前视面板的后方，使生物安全柜保持开启状态。当溢洒的量不足1 mL时，可直接用0.5%过氧乙酸浸湿的纱布擦拭。溢洒量大于1 mL时或容器破碎，应按如下操作：在溢洒物上覆盖浸有0.5%过氧乙酸的吸收材料，作用30 min；小心地将吸收了溢洒物的纱布连同溢洒物收集到专用的收集袋中，并反复用新的纱布将剩余物质吸净；破碎的玻璃或其他锐器要用镊子处理。如果溢洒物流入生物安全柜内部，需要评估后采取适当的处理措施。
5 离心机内溢洒的处理
建议在生物安全三级实验室内使用生物安全型离心机，生物安全型离心机与普通离心机不同在于前者的转子有密封罩，可以连同密封罩将转子取出，一旦发生生物危险物质溢洒，方便对危险因素进行控制。如果打开离心机盖子后发现离心机已经被污染，应立即小心关上，静置30 min后再进行处理。如果离心期间发生离心管破碎，应立即关机，不要打开盖子，切断离心机的电源，静置30 min后进行处理。处理时小心地将离心管转移到专用的收集容器中，一定要用镊子夹取破碎物，必要时可以用镊子夹着棉花收集细小的破碎物，用0.5%过氧乙酸浸湿的纱布吸取溢洒物并作用30 min。取下转子，小心地将转子转移到生物安全柜内，浸泡在75%乙醇内，浸泡30 min以上，或进行包装后，经双扉高压灭菌锅进行消毒处理。用0.5%过氧乙酸擦拭离心转子仓室和其他可能被污染的部位，空气晾干[4]。
6 培养箱或冰箱内溢洒的处理
培养箱、冰箱为生物安全三级实验室内的常用仪器，用于培养细胞或鸡胚、保存样品。如果培养箱内或冰箱内发生生物危险物质溢洒，选择0.5%过氧乙酸对培养箱或冰箱内进行处理。如果溢洒的量不足1 mL时，可直接用0.5%过氧乙酸浸湿的纱布擦拭。溢洒量大于1 mL时或容器破碎，可按该文第4部分提供的方法进行操作。最后用0.5%过氧乙酸擦拭培养箱或冰箱内壁、工作表面以及前视窗的内侧，并用洁净水擦干净消毒剂。
7 评估与报告
一般性的溢洒，由实验室管理层对溢洒处理过程和效果进行评估。发生大量的溢洒时，溢洒处理过程和效果由实验室生物安全委员会进行评估。是否需要对实验室进行彻底的消毒灭菌处理和对暴露人员进行医学评估，由生物安全委员会进行评估后决定。实验人员应按程序记录相关过程和报告，记录意外事故发生和处理登记表。
8 参考文献
[1] 贾伟新，谢淑敏，焦培荣.基于HPAIV实验活动的实验室生物风险分析方法的建立[J].现代农业科技，2012（22）：250-252.
[2] 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.GB19489-2008实验室生物安全通用要求[S].北京：中国标准出版社，2009.
[3] 李勇.实验室生物安全[M].北京：军事医学科学出版社，2009.
[4] 翁景清，李婵，朱炜，等.实验室生物安全管理工作的实践与创新[J].浙江预防医学，2012，24（11）：92-94.
关键词 实验室生物安全；生物风险；溢洒处理
中图分类号 S855.3 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2013）02-0263-01
生物安全三级实验室生物危害物质溢洒处理方法是在生物风险评估的基础上建立起来的[1]，该文建立的生物危害物质溢洒处理方法是基于高致病性禽流感试验活动的，而且经过充分的生物风险分析和评估，是对风险控制方法的具体阐述，旨在给读者提供一种风险控制的思路和方法。但不同实验室的硬件条件、管理体系文件及实验活动内容等各有差异，具体的处理方法应该根据实验室的实际情况而定。
该文中溢洒指包含生物危险物质的液态或固态物质意外地与容器或包装材料分离的过程。该文仅考虑了生物安全三级实验室生物危险物质溢洒的常规处理方法，如果溢洒物中含有放射性物质或危险性化学物质，则应使用特殊的处理程序。
1 溢洒处理工具箱
生物安全三级实验室应备有溢洒处理工具箱，里面放有盛放0.5%过氧乙酸消毒液的容器（注意消毒液必须在有效期内使用）、盛放75%乙醇的容器、镊子、刷子、可高压灭菌的扫帚和簸箕、不锈钢耐扎废物桶、医用纱布、用于盛放感染性溢洒物以及清理物品的专用收集袋或容器、橡胶手套、面部防护装置或全身防护装置、写有“禁止进入”或“生物危险”的溢洒处理警示标识以及其他专用工具。溢洒处理工具箱外部应贴有“溢洒处理工具箱”的标识字样，存放在工作区的墙角[1]。
2 撤离房间
发生生物危险物质溢洒时，应立即通知房间内的无关人员迅速离开，在撤离房间的过程中注意防护气溶胶。关门并张贴“禁止进入”、“溢洒处理”的警告标识。撤离人员按照离开实验室的程序脱去个体防护设备，用适当的消毒剂和水清洗暴露在外的皮肤。如果同时发生了针刺或扎伤，可以用75%乙醇和水清洗受伤区域，挤压伤处周围以促使血往伤口外流；如果发生了黏膜暴露，用水至少冲洗暴露区域15 min。如果没有发生针刺或扎伤等意外情况，则按规定清理完溢洒物后才撤离房间，并立即向实验室安全负责人报告。必要时由实验室安全负责人安排专人清除溢洒物[2]。
3 溢洒区域的处理
采用专门清理工具和物品对溢洒区域进行处理。用0.5%过氧乙酸浸湿的纱布覆盖溢洒物，小心从外围向中心倾倒适量0.5%过氧乙酸消毒剂，使其与溢洒物混合并作用30 min。之后小心地将吸收了溢洒物的纱布收集到专用的套有收集袋的容器中，并反复用新的纱布将剩余物质吸净。破碎的玻璃或其他锐器要用镊子处理。用0.5%过氧乙酸消毒剂清洁被污染的表面。所处理的溢洒物以及处理工具（包括收集锐器的镊子等）全部置于专用的收集袋或容器中并密封好。用0.5%过氧乙酸擦拭可能被污染的区域。按相关規定处理清除溢洒物过程中形成的所有废物[3]。
4 生物安全柜内溢洒的处理
如在生物安全柜内发生生物危险物质溢洒，处理溢洒物时不要将头伸入安全柜内，也不要将脸直接面对前操作口，而应处于前视面板的后方，使生物安全柜保持开启状态。当溢洒的量不足1 mL时，可直接用0.5%过氧乙酸浸湿的纱布擦拭。溢洒量大于1 mL时或容器破碎，应按如下操作：在溢洒物上覆盖浸有0.5%过氧乙酸的吸收材料，作用30 min；小心地将吸收了溢洒物的纱布连同溢洒物收集到专用的收集袋中，并反复用新的纱布将剩余物质吸净；破碎的玻璃或其他锐器要用镊子处理。如果溢洒物流入生物安全柜内部，需要评估后采取适当的处理措施。
5 离心机内溢洒的处理
建议在生物安全三级实验室内使用生物安全型离心机，生物安全型离心机与普通离心机不同在于前者的转子有密封罩，可以连同密封罩将转子取出，一旦发生生物危险物质溢洒，方便对危险因素进行控制。如果打开离心机盖子后发现离心机已经被污染，应立即小心关上，静置30 min后再进行处理。如果离心期间发生离心管破碎，应立即关机，不要打开盖子，切断离心机的电源，静置30 min后进行处理。处理时小心地将离心管转移到专用的收集容器中，一定要用镊子夹取破碎物，必要时可以用镊子夹着棉花收集细小的破碎物，用0.5%过氧乙酸浸湿的纱布吸取溢洒物并作用30 min。取下转子，小心地将转子转移到生物安全柜内，浸泡在75%乙醇内，浸泡30 min以上，或进行包装后，经双扉高压灭菌锅进行消毒处理。用0.5%过氧乙酸擦拭离心转子仓室和其他可能被污染的部位，空气晾干[4]。
6 培养箱或冰箱内溢洒的处理
培养箱、冰箱为生物安全三级实验室内的常用仪器，用于培养细胞或鸡胚、保存样品。如果培养箱内或冰箱内发生生物危险物质溢洒，选择0.5%过氧乙酸对培养箱或冰箱内进行处理。如果溢洒的量不足1 mL时，可直接用0.5%过氧乙酸浸湿的纱布擦拭。溢洒量大于1 mL时或容器破碎，可按该文第4部分提供的方法进行操作。最后用0.5%过氧乙酸擦拭培养箱或冰箱内壁、工作表面以及前视窗的内侧，并用洁净水擦干净消毒剂。
7 评估与报告
一般性的溢洒，由实验室管理层对溢洒处理过程和效果进行评估。发生大量的溢洒时，溢洒处理过程和效果由实验室生物安全委员会进行评估。是否需要对实验室进行彻底的消毒灭菌处理和对暴露人员进行医学评估，由生物安全委员会进行评估后决定。实验人员应按程序记录相关过程和报告，记录意外事故发生和处理登记表。
8 参考文献
[1] 贾伟新，谢淑敏，焦培荣.基于HPAIV实验活动的实验室生物风险分析方法的建立[J].现代农业科技，2012（22）：250-252.
[2] 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.GB19489-2008实验室生物安全通用要求[S].北京：中国标准出版社，2009.
[3] 李勇.实验室生物安全[M].北京：军事医学科学出版社，2009.
[4] 翁景清，李婵，朱炜，等.实验室生物安全管理工作的实践与创新[J].浙江预防医学，2012，24（11）：92-94.