【摘 要】
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目的 采用Vero细胞生物反应器微载体无血清培养甲型流感病毒。方法 将Vero细胞分别采用无血清和有血清培养基于生物反应器（pH 7.2，温度37℃，溶氧量50%，转数60 r/min）中培养24 h，均用无血清培养基进行灌流培养至7 d，进行计数，并按MOI=0.1接种H1N1型流感病毒，加入终浓度为1μg/mL的TPCK-胰酶，于生物反应器（pH 7.8，温度33.0℃，溶氧量25%，转数60
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所
【基金项目】
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云南省自然科学基金（2017FB039）； 中国医学科学院医学与健康科技创新工程（2020-I2M-2-014）;中国医学科学院医学科技创新项目（2016-I2M-3-026）；
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目的 采用Vero细胞生物反应器微载体无血清培养甲型流感病毒。方法 将Vero细胞分别采用无血清和有血清培养基于生物反应器（pH 7.2，温度37℃，溶氧量50%，转数60 r/min）中培养24 h，均用无血清培养基进行灌流培养至7 d，进行计数，并按MOI=0.1接种H1N1型流感病毒，加入终浓度为1μg/mL的TPCK-胰酶，于生物反应器（pH 7.8，温度33.0℃，溶氧量25%，转数60 r/min）中培养18、22、42、48、66 h，取样，检测血凝效价。结果 Vero细胞经无血清和有血清培养基培养7 d的细胞数分别为（133.4±2.0）×10~4和（193.8±1.3）×10~4个/mL，接种H1N1流感病毒66 h后血凝效价几何平均数分别为1∶388和1∶675，前者细胞数及病毒血凝效价几何平均数均显著低于后者（t分别为7.068和4.332,P均＜0.05）。结论 采用Vero细胞通过生物反应器微载体无血清培养H1N1型流感病毒的血凝效价可满足流感病毒裂解疫苗制备的要求。
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