circKDM4C对肺癌细胞增殖和迁移侵袭影响

来源 :中华肿瘤防治杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huangyqing
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目的 本研究探讨circKDM4C在肺癌中的表达及生物学功能.方法 通过qRT-PCR检测circKDM4C在肺癌细胞系A549、H1299、H1650、H1975及肺正常上皮细胞BEAS-2B中的表达.siRNA转染A549和H1975,沉默circKDM4C,获得4组细胞系,分别为A549 si-circKDM4C组和其对应的对照组A549 si-NC,H1975 si-circKDM4C组和其对应的对照组H1975 si-NC.CCK-8和Transwell assay检测4组细胞的增殖、迁移和侵袭情况.流式细胞术检测细胞周期.蛋白质印迹法检测细胞周期抑制蛋白(p53、Rb、p21)和上皮间质转化(EMT)相关蛋白(N-cadherin、E-cadherin、Vimentin)的表达.circKDM4C在肺正常上皮细胞与在各肺癌细胞中的表达进行差异分析,A549 si-circKDM4C组与A549 si-NC组,H1975 si-circKDM4C组与H1975 si-NC组在细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期及相关蛋白表达水平进行差异分析,差异分析采用t检验.结果 circKDM4C在肺癌细胞A549、H1299、H1650和H1975的相对表达量分别为0.52±0.04、0.26±0.03、0.31±0.03和0.48±0.05,均低于正常肺上皮细胞BEAS-2B的表达(1.00±0.09),t值分别为19.21、16.29、31.14和25.41,均P<0.01.转染siRNA后,与对照组A549 si-NC组和H1975 si-NC组相比相比,A549 si-circKDM4C组(t=7.45,P=0.023)和H1975 si-circKDM4C组(t=16.33,P=0.027)中的circKDM4C相对表达量均降低,差异有统计学意义.转染si-circKDM4C后,A549 si-circKDM4C组和H1975 si-circKDM4C组细胞细胞增殖能力提高.Transwell迁移结果显示circKDM4C沉默后,细胞相对迁移数目A549 si-circKDM4C组(2.71±0.20)比A549 si-NC组(1.02±0.08)高,t=17.67,P=0.009;H1975 si-circKDM4C组(3.02±0.13)同样比H1975 si-NC组(1.01±0.05)高,t=26.27,P=0.004.Transwell侵袭结果显示侵袭相对细胞数量A549 si-circKDM4C组(2.54±0.15)比A549 si-NC组(1.04±0.10)高,t=21.62,P=0.007;H1975 si-circKDM4C组(3.73±0.32)比H1975 si-NC组(1.02±0.10)高,t=25.74,P=0.002.circKDM4C沉默后,促进了细胞周期,降低了周期抑制蛋白p53、Rb和p21的表达;此外N-cadherin和Vimentin表达增加,E-cadherin表达降低,促进了肺癌细胞上皮间质转化.结论 circKDM4C抑制了肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭为肺癌患者提供了潜在的治疗靶点.
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