【摘 要】
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目的:构建表达肠毒素性大肠杆菌菌毛抗原基因CS6和霍乱毒素B亚基(CTB)基因的细菌性腹泻基因工程多价疫苗.方法:以基因工程减毒的人伤寒沙门菌为抗原载体,利用基于asd基因功能
【机 构】
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军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071
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目的:构建表达肠毒素性大肠杆菌菌毛抗原基因CS6和霍乱毒素B亚基(CTB)基因的细菌性腹泻基因工程多价疫苗.方法:以基因工程减毒的人伤寒沙门菌为抗原载体,利用基于asd基因功能互补的宿主染色体-质粒平衡致死表达系统,实现了在没有抗生素选择压力的条件下,CS6和CTB在人伤寒沙门菌中的稳定表达.结果与结论:检测结果表明,CS6和CTB的表达虽对宿主菌的生长有一定影响,但经过一段时间的培养,重组菌株仍可达到高密度生长.动物免疫结果显示,重组菌株在家兔体内均可诱生相应抗体,但从诱生的抗体效价、抗体持续时间方面评价,单独表达CS6与CTB的重组菌株的免疫学效果均好于两者共表达的重组菌株,提示在以后的疫苗研究实践中,可以考虑将分别表达CS6与CTB的重组菌株按一定比例混合,组成联合疫苗,用于细菌性腹泻的免疫预防.本研究结果对于细菌性腹泻基因工程多价疫苗的构建有指导意义.
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