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73.NO诱导血管平滑肌细胞凋亡原癌基因调控的初步研rn究田雪梅李进第一军医大学组织学胚胎学教研室rn广州 510515 血管平滑肌细胞(VSMC)异常增殖引起的rn细胞数量过度增加是动脉粥样硬化发生发展的一个主要病rn理特征,而VSMC凋亡又在其中起着重要作用.引起细胞凋rn亡的因素有多种,近期发现,广泛存在于心血管系统的一氧rn化氮(NO)除已知的多种生物作用外,还具有诱导巨噬细胞、rnVSMC凋亡的功能.但是,NO诱导VSMC凋亡的调控机制rn尚不十分明确.而bcl-2、p53、bax、c-myc、fas等都是参与细rn胞凋亡调控的原癌基因.鉴此,本实验探讨NO诱导VSMCrn凋亡与bcl-2、p53、bax之间的关系.方法:采用贴块法培养大rn鼠主动脉VSMC,3～8代细胞用于实验.以亚硝基乙酰青霉rn胺(SNAP)作为NO供体.构建逆转录病毒载体,将bcl-2基rn因转入VSMC,使VSMC中bcl-2蛋白过量表达,通过原位rn末端标记和流式细胞术检测VSMC在SNAP作用下的凋rn亡.并采用免疫荧光染色,借助粘附式细胞仪(ACAS507)检rn测细胞中bcl-2、p53、bax原癌蛋白表达的变化.结果:通过转rn染bcl-2基因能使VSMC中bcl-2蛋白过量表达,且能使rnSNAP作用下VSMC的凋亡率减少,而细胞中p53、bax蛋rn白表达在转染和未转染bcl-2的VSMC中无明显差异.结rn论:bcl-2过量表达阻止NO诱导的VSMC凋亡,但此作用rn不是通过减少细胞中p53、bax蛋白的表达,而可能是通过增rn加Bcl-2/bax比例的方式实现的.rn