传染性支气管炎病毒纤突蛋白S1基因的T/A载体克隆策略

来源 :城市道桥与防洪 | 被引量 : 0次 | 上传用户：oliu1113

【摘要】

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参考Genbank收录的IBV纤突蛋白(S1)基因序列,自行设计合成一对引物,对传染性支气管炎病毒(IBV)江苏省地方分离毒株(JS/95/03)RNA进行RT-PCR扩增,产物经琼脂糖凝胶电泳分析,呈

【作者】

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陈德胜潘杰彦戴亚斌蔡宝祥陈溥言

【机构】

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南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095

【出处】

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城市道桥与防洪

【发表日期】

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2004年期

【关键词】

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传染性支气管炎病毒 S1基因 T载体

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参考Genbank收录的IBV纤突蛋白(S1)基因序列,自行设计合成一对引物,对传染性支气管炎病毒(IBV)江苏省地方分离毒株(JS/95/03)RNA进行RT-PCR扩增,产物经琼脂糖凝胶电泳分析,呈现一条1 716 bp的条带,将其克隆入T/A质粒pMD18-T载体中,转化大肠杆菌JM109,挑选阳性克隆,用质粒少量提取法提取重组质粒,用EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切对重组克隆质粒进行鉴定,然后进行序列测定,证实为S1基因.将此重组质粒命名为pMDJS9503S.

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