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目的
通过对90株多重耐药革兰阴性菌携带的整合子及耐药基因盒类型的检测,探讨整合子、基因盒与耐药表型的相关性。
方法采用PCR法扩增90株革兰阴性菌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合子及整合子阳性菌株的可变区,测序分析整合子可变区耐药基因盒的类型;药敏试验检测整合子阳性菌株与阴性菌株的耐药率。
结果90株多重耐药革兰阴性菌中整合子检出率为81.1%(73/90),其中有Ⅰ类整合子70株,Ⅱ类整合子3株,未检测出Ⅲ类整合子。Ⅰ类整合子可变区扩增片段介于730~3300 bp,GenBank数据库BLAST分析,检测到8种整合子基因盒谱,分别为aadB 11株、aac(6′)-Ⅱ7株、aad A5 10株、dfr A17-aad A5 14株、dfr A12-Orf F-aad A2 1株、aac A4-catB8-aad A1 24株、aacC1-Orf A-OrfB-aad A1 3株与catB3-aadB-dhfr V-aac A4-nit1-nit2 1株,其中catB3-aadB-dhfr Vaac A4-nit1-nit2是一种新型的耐药基因盒组合形式;Ⅱ类整合子可变区片段为1600 bp,3株均携带sat2-aad A1基因盒。药敏试验表明整合子阳性菌株对氨基糖苷类和磺胺类药物耐药率高,与整合子可变区耐药基因盒的结果相符;阳性菌株对阿米卡星较为敏感,耐药率为32.9%(24/73);另外所有菌株对多数β-内酰胺酶类药物耐药率≥80%。
结论多重耐药革兰阴性菌Ⅰ类整合子携带率较高,且菌株耐药表型与其整合子可变区耐药基因盒的类型有相关性。