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乙酰胆碱酯酶是昆虫体内重要的生化标记物，利用其活性的变化可以监测农药对昆虫的亚致死效应。乙酰胆碱酯酶活性测定的条件会因为来源于不同的物种甚至同一物种不同部位而改变。本文采用正交试验排列的25个组合试验探究了酶浓度、底物浓度、pH、反应温度及反应时间5个因素对测定中华蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶比活力的影响，并从中选择出最佳测定组合。试验结果表明，5个因素对中华蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶比活力影响的大小顺序为酶浓度〉反应温度〉pH〉反应时间〉底物浓度，各因素最佳组合为酶浓度0．25g／L、底物浓度0．8mmol／L、pH