枯草杆菌ylyA基因表达载体的构建及诱导表达

来源 :山西农业大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangchello
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ylyA是枯草杆菌的一种功能未知基因,本研究旨在建立YlyA的诱导表达体系,为其结构分析和功能研究奠定基础。PCR扩增YlyA序列,将其克隆到pETMCSⅢ中构建表达载体pNG252,测序分析无突变后用IPTG诱导6×His—YlyA融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,对表达产物进行分析。实验结果表明:pNG252中y13,A插入方向正确,序列无突变;新鲜的转化子培养至OD600为0.7左右时,用0.0005mol·L^-1 IPTG,37℃诱导3h,YlyA高效表达。因此本研
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