1,25(OH)2D3对载脂蛋白E缺乏鼠主动脉内皮细胞增生与凋亡及一氧化氮合酶表达的影响

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目的 了解1,25(OH)2D3对载脂蛋白E缺乏鼠(apoE-/-)主动脉内皮细胞(EC)增生、凋亡及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响.方法 apoE-/-鼠主动脉EC分离培养,MTT法观察1,25(OH)2D3影响apoE-/-鼠EC生长,TUNEL检测细胞凋亡,RT-PCR检测Bc1-2、Fas mRNA和eNOS mRNA表达.结果 细胞对照组与无水乙醇对照组EC增生率差异无统计学意义[(0.162±0.031)vs.(0.158±0.006),p>0.05],1,25(OH)2D3在10-4、10-5、10-6、10-7、10-8 mol/L时EC增生率高于对照组(P<0.01),但不同浓度1,25( OH)2D3作用组之间差异无统计学意义[分别为(0.189±0.013)、(0.285±0.011)、(0.296±0.026)、(0.284±0.017)、(0.233±0.010),P >0.05],选定10-6mol/L 1,25(OH)2D3为研究浓度,干预分离培养apoE-/-鼠主动脉EC.1,25( OH)2D310-6mol/L组、细胞对照组、无水乙醇对照组凋亡指数分别为(15.14±3.19)、(18.94 ±4.22)、(19.27±4.58),Bcl-2 mRNA分别为(0.78±0.16)、(0.46±0.21)、(0.42±0.17),Fas mRNA分别为(0.43±0.12)、(0.79±0.21)、(0.81±0.20),eNOS mRNA分别为(0.56±0.16)、(0.39±0.13)、(0.35±0.11).25(OH)2D3干预组EC凋亡指数、Fas mRNA、eNOS mRNA降低,Bcl-2 mRNA增高(P均<0.01),细胞对照组与无水乙醇对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).相关分析发现在1,25(OH)2D3干预组,eNOS表达量与凋亡指数、Fas mRNA呈负相关(r=-0.676、-0.758),与Bcl-2表达呈正相关(r =0.762),差异有统计学意义(P均<0.01).结论 1,25(OH)2D3刺激apoE-/-鼠主动脉EC增生、抑制主动脉EC凋亡,影响凋亡相关基因Bcl-2、Fas mRNA表达,上调eNOS mRNA表达.
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