探讨饱和氢盐水对心肌缺血再灌注损伤老年大鼠心肌细胞自噬的影响。
方法选取健康清洁级雄性SD大鼠150只,18月龄,体重400~540 g。采用随机数字表法将其分为5组(n=30):空白对照组(Ⅰ组)、假手术组(Ⅱ组)、缺血再灌注组(Ⅲ组)、饱和氢盐水治疗组(Ⅳ组)、生理盐水治疗组(Ⅴ组)。Ⅰ组不做任何处理;Ⅱ组大鼠仅穿线不结扎;Ⅲ组制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型;Ⅳ组于再灌注前5 min给予1 ml/100 g腹腔注射饱和氢生理盐水;Ⅴ组于再灌注前5 min给予1 ml/100 g腹腔注射等量生理盐水。采用HE染色观察心肌病理学,采用MDC荧光染色,流式细胞仪定量检测心肌细胞自噬率,采用蛋白质印迹法检测心肌细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、Beclin基因1(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白含量。
结果与Ⅰ组、Ⅱ组比较,Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组大鼠心肌缺血再灌注后12 、24 h心肌细胞自噬率升高(F=23.45,26.65,25.58),心肌细胞AMPK(F=23.16,25.15,27.85)、mTOR(F=21.04,24.83,27.43)、Beclin1(F=22.15,25.79,29.05)和LC3(F=22.58,27.25,28.46)蛋白表达升高(均P<0.05)。与Ⅲ组、Ⅴ组比较,Ⅳ组大鼠心肌缺血再灌注后12、24 h心肌细胞自噬率降低(F=21.29,24.71),心肌细胞AMPK(F=22.37,25.84)、mTOR(F=20.48,22.38)、Beclin1(F=21.76,28.43)和LC3(F=22.54,27.21)蛋白表达降低(均P<0.05)。
结论饱和氢盐水可通过降低心肌细胞自噬,减轻老年大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与降低心肌细胞AMPK、mTOR、Beclin1和LC3蛋白表达有关。