【摘 要】
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目的 探讨Osteoglycin (OGN)基因是否通过上调雌激素受体(ER)的表达抑制Luminal型乳腺癌细胞增殖.方法 ①通过Ualcan在线数据库分析OGN在乳腺癌样本中的mRNA表达情况,使用Kaplan-Meier Plotter在线分析OGN高或低表达(以OGN在乳腺癌患者中表达的中位数为界限)对乳腺癌患者预后的影响.②实时定量PCR (qRT-PCR)法检测OGN在Luminal型乳腺癌临床组织样本中的表达.③通过转染过表达OGN的质粒上调Luminal型乳腺癌细胞系MCF-7和T47D细
【机 构】
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武汉市第一医院甲状腺乳腺外科 武汉430030
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目的 探讨Osteoglycin (OGN)基因是否通过上调雌激素受体(ER)的表达抑制Luminal型乳腺癌细胞增殖.方法 ①通过Ualcan在线数据库分析OGN在乳腺癌样本中的mRNA表达情况,使用Kaplan-Meier Plotter在线分析OGN高或低表达(以OGN在乳腺癌患者中表达的中位数为界限)对乳腺癌患者预后的影响.②实时定量PCR (qRT-PCR)法检测OGN在Luminal型乳腺癌临床组织样本中的表达.③通过转染过表达OGN的质粒上调Luminal型乳腺癌细胞系MCF-7和T47D细胞中OGN的表达水平后再用qRT-PCR和Western blot法检测细胞中OGN和ER表达变化,同时采用CCK8法和克隆形成实验检测过表达OGN的MCF-7和T47D细胞的增殖和克隆形成能力.④采用siRNA瞬时转染干扰过表达OGN的乳腺癌细胞系后再检测ER (ESR1)的表达,同时采用CCK8法检测下调过表达OGN乳腺癌细胞系ER表达后的增殖能力.结果 ①Ualcan在线数据库中,OGN mRNA在不同类型乳腺癌组织中的表达均低于正常乳腺组织(P＜0.001)且在Luminal型乳腺癌组织中表达最高(P＜0.001).Kaplan-Meier Plotter预后分析结果显示,在所有乳腺癌或Luminal型乳腺癌患者中,OGN高表达者的预后情况均优于OGN低表达者(P=0.00014,P=0.00180).②临床病例数据中,OGN mRNA在Luminal型乳腺癌组织中低于其相应的癌旁组织(t-4.774,P=0.000019).③转染过表达OGN质粒后MCF-7和T47D细胞中OGN和ER表达均上调(P=0.000002、P=0.000001);且细胞增殖均被抑制(P＜0.05),细胞克隆数明显减少(P＜0.05).④siRNA瞬时转染干扰过表达OGN的乳腺癌细胞系后,ER mRNA水平降低(P＜0.05),细胞增殖能力明显增强(P＜0.05).结论 OGN在Luminal型乳腺癌中发挥抑癌作用,其可能机制在于上调ER的表达.
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