【摘 要】
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目的为了构建犬小孢子菌FSH1基因的RNA干扰重组质粒,并验证其干扰效率。方法以犬小孢子菌FSH1基因全长cDNA为模板,利用PCR技术扩增FSH1基因,将质粒pUC-PUT进行双酶切使其线性
【机 构】
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大连市友谊医院皮肤科,大连医科大学,成都市第二人民医院皮肤科,大连医科大学附属第一医院
【基金项目】
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国家自然科学基金(81071330)
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目的为了构建犬小孢子菌FSH1基因的RNA干扰重组质粒,并验证其干扰效率。方法以犬小孢子菌FSH1基因全长cDNA为模板,利用PCR技术扩增FSH1基因,将质粒pUC-PUT进行双酶切使其线性化,插入FSH1正向及反向干扰序列,获得中间载体pUC-PFUFT,将其及质粒pCB-309双酶切后连接,构建干扰载体pCB309-PFULFT。将其转化根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105,获得犬小孢子菌FSH1基因RNA干扰的转化体系。用实时定量PCR方法对犬小孢子菌FSH
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