评价一氧化碳(CO)对氧糖剥夺/复氧复糖诱发大鼠神经元焦亡的影响及其与线粒体通透性转换孔/活性氧(mPTP/ROS)信号通路的关系。
方法体外培养大鼠原代海马神经元，接种于6孔板或96孔板，采用随机数字表法分为5组(n＝24)：对照组(C组)、氧糖剥夺/复氧复糖组(OGD/R组)、CO后处理组(CO组)、mPTP特异性开放剂苍术苷＋CO后处理组(ACO组)、ROS特异性诱导剂抗霉素A＋CO后处理组(KCO组)。采用无糖培养基低氧(1%O2)孵育16 h再正常培养24 h的方法制备氧糖剥夺/复氧复糖损伤模型。CO组于低氧处理结束即刻在2% CO-5% CO2混合气体中37 ℃培养3 h，随后正常培养21 h。ACO组和KCO组于低氧处理结束分别加入苍术苷20 μmol/L和抗霉素A 50 μmol/L，其余处理同CO组。各组处理结束后，采用免疫荧光双染cleaved caspase-1-AlexaFluor 568/DAPI法确定神经元焦亡率。采用四甲基偶氮唑法确定神经元存活率，采用钙黄绿素法测定mPTP开放程度，采用二氯荧光黄双乙酸盐法测定ROS含量，采用Western blot法检测IL-1β、IL-18的表达。
结果与C组比较，其余各组海马神经元焦亡率、ROS含量和mPTP开放程度升高，存活率降低，IL-1β和IL-18表达上调(P<0.05)；与OGD/R组比较，CO组、ACO组和KCO组海马神经元焦亡率、ROS含量和mPTP开放程度降低，存活率升高，IL-1β和IL-18表达下调(P<0.05)；与CO组比较，ACO组和KCO组海马神经元焦亡率和ROS含量升高，存活率降低，IL-1β和IL-18表达上调，ACO组mPTP开放程度升高(P<0.05)。
结论CO后处理可抑制氧糖剥夺/复氧复糖诱发大鼠神经元焦亡，机制与抑制mPTP/ROS信号通路有关。