有关植物双向电泳体系建立中几个问题的探讨

来源 :昆明学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liunian2008
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双向电泳技术是目前最常用的能够从植物组织中分离出上千种蛋白的技术.因此,需对蛋白样品制备过程、等电聚焦、第二相电泳、染色等进行分析探讨,结果表明,样品制备需根据样品的成分选择不同的裂解液成分(如:CHAPS,TritonX-100和DTT等);胶条越长要求上样量越大(考染上样量约为银染上样的5倍),等电聚焦电压越大,聚焦过程也越长;SDS-PAGE胶体积分数为10%~15%,常用12%;第二相电泳需选择恒定电流,且先以10mA/胶,跑0.5~1.0h,再以大电流30mA/胶至第二相电泳完成.
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