【摘 要】
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目的：基因重组技术构建重组质粒pEGFP-C1-ERβ并检测其在结肠癌细胞株Caco-2中的表达．方法：应用RT-PCR从人结肠癌手术患者正常切缘组织中分离、扩增目的基因片段，将所得cDNA定向
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科
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目的：基因重组技术构建重组质粒pEGFP-C1-ERβ并检测其在结肠癌细胞株Caco-2中的表达．方法：应用RT-PCR从人结肠癌手术患者正常切缘组织中分离、扩增目的基因片段，将所得cDNA定向克隆到真核表达载体pEGFP-C1中，采用双酶切和测序分析鉴定插入基因的序列；脂质体介导重组质粒pEGFP-C1-ERβ瞬时转染Caco-2并上流式细胞仪分选，获得比较单一的转染细胞：分别采用RT-PCR、Western blot检测转染前后ERβ基因不同分子水平表达．结果：酶切鉴定和测序分析表明重组表达质粒pEG
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