胸苷激酶基因治疗胃癌的体外实验

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:JK0803_shijiwu
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
将单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-tk)导入恶性肿瘤细胞,随后可应用药物丙氧鸟苷(ganciclovir, GCV)选择性杀死肿瘤细胞.构建了含胸苷激酶与潮霉素磷酸转移酶(hph)融和基因(HytK)的真核表达载体LXpsp-HytK.以脂质体(lipofectin)为介导,将这种质粒与仅含潮霉素B基因的质粒LXSH 分别转染胃癌细胞系BGC-823,用60 U/m l潮霉素B进行筛选,得到了可稳定传代的阳性克隆,分别命名为BGC-HytK 和BGC-Hy.三种细胞的生长曲线无明显差别.用不同浓度的GCV 分别作用于BGC-HytK, BGC-Hy 及BGC-823,0.02~200 μg/m l 的GCV 对BGC-HytK 细胞有明显的杀伤作用(IC50= 0.02 μg/m l),而对另外两种细胞几乎无毒性作用(IC50> 200μg/m l).20 μg/m lGCV 作用96 h 后,仅存在20% 的BGC-HytK 就可使周围的大部分HSV-tk- 的肿瘤细胞死亡,说明存在较显著的“旁观者效应” Herpes simplex virus thymidine kinase gene (HSV-tk) was introduced into malignant cells, and then the drug ganciclovir (GCV) was used to selectively kill tumor cells. An eukaryotic expression vector LXpsp-HytK containing thymidine kinase and hygromycin phosphotransferase (hph) fusion gene (HytK) was constructed. Using lipofectin as a mediator, this plasmid was transfected into the gastric cancer cell line BGC-823 with the plasmid LXSH containing only the hygromycin B gene and screened with 60 U/ml hygromycin B. Positive clones that can be stably passaged are named BGC-HytK and BGC-Hy. There was no significant difference in the growth curves of the three cells. Different concentrations of GCV were applied to BGC-HytK, BGC-Hy and BGC-823, respectively, and GCV of 0.02-200 μg/ml had significant killing effect on BGC-HytK cells (IC50= 0.02 μg/m). l), with almost no toxic effects on the other two cells (IC50> 200 μg/ml). After 20 μg/ml GCV for 96 h, the presence of only 20% of BGC-HytK killed most of the surrounding HSV-tk-tumor tumor cells, suggesting a significant “bystander effect”.
其他文献
人们总是喜欢用美丽的事物来装饰自己的家,可心灵的窗口又该怎么装饰呢?以色列化妆师泰勒·皮勒格用液体眼线笔和眼影,告诉我们心灵的窗口同样可以很美丽。泰勒在眼皮上绘出
期刊
出自天然的材料在家庭装修中永不过时,原因在于它们有可靠的价值。同时,不管树木或石材的纹路,还是植物的透明与花瓣的感觉,都拉近了人与自然的距离。人们喜欢用这些材料,它
清炖滋补羊肉食材:羊腿一根,土豆、红萝卜各两个。调料:葱、姜、花椒、香菜适量。做法:1.羊腿切块,过开水,放入锅中。加适量的水,加入花椒适量,大火加热。2.葱、姜切段,土豆
目的:观察ELE与LIP乳化栓塞剂不同配制比的物理稳定性,释放速率及乳粒大小,考证其临床适用性。方法:将MMC溶解于ELE或60% UR中,采用“二泵一间隔”法与40% LIP混合成不同配制
以Keratin19cDNA的套式引物建立了巢式RT-PCR扩增Keratin19mRNA的体系及PAGE-银染检测扩增产物的方法;对扩增体系进行优化后,分析了扩增特异性及检测敏感性,并对临床样品作了初步检测.结果表明:该扩增体系具有较好的特异
对大多数女性来说,成为妈妈是生命中最盛大的加冕典礼,那意味着,我们从此多了一个角色,开启了人生的另一段体验。那么,当我们越来越熟稔“妈妈”这个角色时,是否还会同当初一
君权神授论认为君主的权力是上帝赋予的,而不是来自于臣民;国王是上帝在尘世中的代表,国王不会有错;上帝才有权惩治邪恶的国王。中世纪时期,查士丁尼皇帝竭力歌颂君主的权力,
今年上半年,受需求拉动、成本上升、国际市场价格上涨等因素影响,国内钢材价格持续攀升。上半年主要钢材品种全国平均价格为5593元/吨,与去年同期相比上涨35.56%。其中,建材、板材、管材、型材平均价格分别为5115元/吨、6107元/吨、6236元/吨、5065元/吨,与去年同期相比分别上涨50.15%、25.66%、26.23%、47.49%。  从具体走势来看,上半年钢材价格以持续上涨走势为主
乳腺癌是妇女常见恶性肿瘤之一,目前治疗仍以手术为主,但术后复发和转移是影响预后的重要因素,提高晚期乳腺癌化疗效果乃当今重要研究课题。我院自1995年11月,用泰素(Taxo)联合表阿霉素治疗58例
对某电解铝厂职工恶性肿瘤死亡情况进行了10年回顾性队列研究,以宁夏1990~1992年人口年龄死亡专率为参比,计算了观察队列标化死亡比(SMR)、癌症比例死亡比(PMR和PCMR),观察组肺癌超出量尤为显著,SMR为190(P<001),PCMR为171(P<005)。