新德里1型金属β内酰胺酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学特征及耐药机制

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目的

研究南昌大学第一附属医院产新德里金属β内酰胺酶(NDM)肺炎克雷伯菌的分子表型、流行病学和耐药基因环境特征。

方法

回顾性研究。收集2011年1月至2012年12月我院住院患者临床分离的非重复碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌110株,使用生物梅里埃公司生产GN13的检测菌株的MIC值,改良Hodge试验进行产碳青霉烯酶确认,同时对试验菌株的blaNDM-1基因及ISAba125-NDM连锁PCR检测,并将扩增产物纯化、克隆后进行基因测序。多位点序列分析(MLST)技术分析耐药菌株间的亲缘性。对阳性株进行质粒接合和消除试验,并对接合子及质粒消除后菌株进行PCR扩增及碳青霉烯类抗生素MIC值的检测。采用Fisher确切概率法对耐药率进行比较。

结果

110株碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌中检出NDM基因阳性率为13%(14/110),经测序确认为blaNDM-1基因。14株产NDM-1型金属β内酰胺酶菌株厄他培南、亚胺培南及美罗培南的耐药率均为14/14,环丙沙星耐药率为10/14,左氧氟沙星耐药率为9/14,阿米卡星耐药率为5/14,氨曲南耐药率11/14。ISAba125-NDM连锁检测阳性率为14/14。14株blaNDM-1基因阳性菌质粒接合试验均为成功,接合子对亚胺培南、美罗培南及厄他培南的MIC值增高4~64倍,PCR扩增接合子大肠埃希菌J53 blaNDM-1基因及ISAba125-NDM连锁均为阳性。而质粒分析发现blaNDM-1基因及ISAba125-NDM连锁位于一大小约65 000 bp质粒上。

结论

本地区新德里金属β内酰胺酶肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类抗生素及氨曲南的耐药率相对较低,blaNDM-1基因主要位于质粒上可通过接合方式传播,易于在菌株间流行,应当引起临床高度重视;插入序列ISAba125可能参与了blaNDM-1基因的介导。(中华检验医学杂志,2014,37:753-757)

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