【摘 要】
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目的对多重PCR、巢式PCR、实时PCR检测结果进行比较,筛选适合低密度恶性疟原虫血症的检测方法。方法实验室培养恶性疟原虫,同步化处理至环状体期占99%以上时涂制薄血膜,计数
【基金项目】
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亚洲消除疟疾合作网络(APMEN)资助项目(No.108-06)
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目的对多重PCR、巢式PCR、实时PCR检测结果进行比较,筛选适合低密度恶性疟原虫血症的检测方法。方法实验室培养恶性疟原虫,同步化处理至环状体期占99%以上时涂制薄血膜,计数其原始密度。实验分3组,原虫血均按1︰40、1︰80、1︰160、......1︰40 960等11个梯度进行稀释,涂制厚血膜,并用显微镜检查确定低密度恶性疟原虫血症密度;再作倍比系列稀释,用3种PCR方法进行检测,确定各种检测方法的检测限,并进行比较。结果经显微镜检查确定配制的待测血样恶性疟原虫密度为21.92个/μl,多重PCR检测限为0.171 3个疟原虫/μl血,实时PCR为0.171 3个疟原虫/μl血,巢式PCR为0.085 6个疟原虫/μl血。检出率巢式PCR≥实时PCR>多重PCR。结论 3种PCR方法均可用于检测低密度恶性疟原虫血症。巢式PCR检出率和检测限均优于其他两种方法。
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