绿木霉ZY-01中纤维素酶EGⅣ基因的克隆及其在E.coli中的原核表达

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以前期筛选到的纤维素酶高产菌株绿木霉T.virideZY-01的总RNA 为模板,利用RT-PCR技术克隆出内切葡聚糖酶EGⅣ基因,连接至pET-28a构建出重组质粒,并转化至E.coliBL21(DE3)中表达.该EGⅣ基因约有1089bp,在启动子T7lac的控制和IPTG 的诱导下,目的基因成功地在原核细胞中表达.通过SDSPAGE检测得出目标蛋白分子量为39kDa,重组酶的比酶活为1.05U/mg,该酶最适pH 值为6、最适反应温度为50℃.
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