【摘 要】
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目的 分析微小 RNA(microRNA,miR)-29b通过靶向转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)调控免疫因子白介素(interleukin,IL)-6和IL-10参与多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞增殖和侵袭的机制.方法 双荧光素酶报告实验验证miR-29b和STAT3的靶向关系.将人MM细胞系U266细胞分为对照(normal control,NC)组、miR-29b 模拟物(m
【机 构】
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110032沈阳,辽宁中医药大学第一临床学院;110032沈阳,辽宁中医药大学附属医院血液科;110001沈阳,中国医科大学附属第一医院老年呼吸科;110032沈阳,辽宁中医药大学附属医院血液科
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目的 分析微小 RNA(microRNA,miR)-29b通过靶向转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)调控免疫因子白介素(interleukin,IL)-6和IL-10参与多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞增殖和侵袭的机制.方法 双荧光素酶报告实验验证miR-29b和STAT3的靶向关系.将人MM细胞系U266细胞分为对照(normal control,NC)组、miR-29b 模拟物(mimic)组、STAT3过表达(over expression STAT3,OE-STAT3)组和 miR-29b mimic+OE-STAT3组,根据组别转染miR-29b mimic或者STAT3过表达质粒.通过CCK-8法、细胞划痕和Transwell实验检测细胞增殖活力、迁移和侵袭能力.通过ELISA检测培养基中IL-6和IL-10水平.结果 通过双荧光素酶报告在U266细胞中验证miR-29b靶向STAT3.与NC组比较,miR-29b mimic组细胞的STAT3mRNA和蛋白的表达水平、OD值、划痕前缘迁移距离百分比(26.79％±1.56％)、侵袭细胞数目(34.59±2.93)、培养基中 IL-6(9.37 pg/ml±1.12 pg/ml)和IL-10(3.86 pg/ml±0.48 pg/ml)水平显著降低,而OE-STAT3组的上述指标均升高(P＜0.05).miR-29b mimic+OE-STAT3组的STAT3 mRNA和蛋白的表达水平、划痕前缘迁移距离百分比(49.06％±3.27％)、侵袭细胞数目(90.31±4.07)、培养基中IL-6(16.23 pg/ml±1.75 pg/ml)和IL-10(7.55 pg/ml±0.82 pg/ml)水平显著低于OE-STAT3组且显著高于miR-29b mimic组(P＜0.05).结论 miR-29b可能通过靶向STAT3的表达来抑制MM细胞的增殖、迁移、侵袭,并抑制IL-6和IL-10的表达解除免疫抑制.
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