高效液相色谱测定食品中抗坏血酸含量的方法优化

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本文通过对样品提取方式、提取剂、流动相等条件进行改进和优化,建立了一种同步测定食品中 L-抗坏血酸、D-抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的方法。针对果蔬样品,采用液氮冷冻研磨进行预处理,相比机械匀浆,可以显著提高提取率,减少化学试剂用量,简化前处理操作。为保护 L-抗坏血酸不被氧化,在偏磷酸提取液中加入 0.019 mol/L 硫代硫酸钠作为保护剂,结果表明,实验无需避光操作,提取物可在 4 24 h℃ 内保持性质稳定;采用磷酸二氢钾-癸胺缓冲盐混合溶液作为流动相,可以使不同构型抗坏血酸在较高浓度时依然达到基线分离。抗坏血酸在 0.5 mg/L~200 mg/L 范围内呈良好线性关系,检出限为 0.04 mg/100 g。样品回收率为99.7%~107.3%,相对标准偏差为 3.80%。对于准确测定食品中活性抗坏血酸的组分含量、建立标准化操作规程具有重要意义。
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